人参茎叶皂苷对鸡的免疫和抗氧化作用研究

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在现代集约化养禽业中,饮食、环境、管理和疾病等相关因素可单独或联合作用于禽的抗氧化系统和免疫系统,引起氧化应激和免疫抑制。氧化应激会引发禽的多种疾病,如囊包性纤维症、腹水综合征和肺动脉高压症等,同时使肉鸡与蛋鸡的品质下降,从而影响禽类的健康并造成经济损失。因此,寻找一种安全有效的抗氧化方法具有重要意义。当免疫抑制发生时,禽类传染病的发病率和死亡率都会增高,且易导致继发感染和疫苗免疫的失败,从而引起严重的经济损失。目前国内对新城疫(ND)、禽流感(AI)和禽传染性支气管炎(IB)等疫病的防控主要依赖于疫苗,然而在免疫抑制状态下导致的疫苗免疫失败,严重情况下会引起这些疾病的爆发。因此寻找合适的方法,使疫苗产生有效的保护作用十分重要。本论文主要研究鸡饮水口服人参茎叶皂苷(GSLS)对鸡氧化应激和疫苗免疫效果的影响,为养鸡生产应用GSLS抗氧化应激和提高疫苗免疫效果提供依据。  为了研究口服人参茎叶皂苷对鸡抗氧化作用的影响,我们首先采用胸肌注射环磷酰胺(CY)建立氧化应激模型,CY剂量为100mg/kg BW,每日1次,连用3天;CY处理后,再通过饮水途径给鸡口服GSLS,剂量分别为2.5、5、10mg/kg BW,每日1次,连用7天。结果表明口服GSLS有抗氧化作用,且对处于氧化应激状态的鸡效果优于健康鸡。在CY诱导的鸡氧化应激模型中,口服GSLS的鸡免疫器官脏器指数、总抗氧化能力(T-AOC),谷胱甘肽(GSH)、维生素C(VC)和维生素E(VE)的水平,超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性显著高于不给药组,同时蛋白质羰基和丙二醛(MDA)的含量也显著降低。  为了研究口服GSLS对鸡新城疫-禽流感(ND-AI)二联灭活疫苗和鸡新城疫-鸡传染性法氏囊病(ND-IB)二联弱毒疫苗的免疫效果的影响,我们采用胸肌注射CY建立免疫抑制模型,方法同前。CY处理后,通过饮水途径给鸡口服GSLS,剂量分别为2.5、5、10mg/kgBW,每日1次,连用7天;设黄芪多糖(APS)阳性对照组,按照说明书将黄芪多糖加入水中(200 mg/升),让鸡饮水,连续给药7天。在给药结束后给鸡免疫ND-AI二联灭活疫苗(试验一)或者ND-IB二联弱毒疫苗(试验二)。结果表明,口服GSLS可以增强健康鸡和免疫抑制鸡免疫灭活苗(ND-AI)和弱毒疫苗(ND-IB)的效果,表现为体液免疫、细胞免疫以及肠道黏膜免疫显著增强,以GSLS中剂量组(5 mg/kg BW)的免疫增强幅度最高。在CY诱导的免疫抑制鸡模型中,口服GSLS的鸡免疫器官(脾脏、胸腺和法氏囊)指数,血清中特异性NDV-、AIV-和IBV-抗体水平,脾脏淋巴细胞增殖反应,十二指肠粘膜IgA+细胞和上皮内淋巴细胞(iIEL)数量,显著高于不给药的对照组,效果类似于阳性对照药物(APS)对照组。在没有注射CY的健康鸡,GSLS中剂量(5 mg/kgBW)可显著增加健康鸡血清中特异性NDV-、AIV-和IBV-抗体效价,脾脏淋巴细胞增殖反应,十二指肠IgA+细胞和十二指肠肠绒毛中肠内皮淋巴细胞(iIEL)的数量。因此,GSLS对免疫抑制鸡和健康鸡均具有免疫增强作用。  为了研究口服GSLS对海兰蛋鸡ND-IB二联弱毒疫苗免疫效果的影响,我们给鸡饮水口服GSLS,剂量为5 mg/kg BW,每日1次,连用7天;设黄芪多糖阳性药物对照组。结束给药后给鸡滴鼻免疫ND-IB二联弱毒疫苗,免疫后检测抗体效价。结果显示饮水口服GSLS对海兰蛋鸡免疫ND-IB二联弱毒疫苗可显著提高鸡血清特异性抗NDV和抗IBV的抗体效价,抗体水平和APS组比较无显著差异;鸡口服GSLS之后在饮水、采食、行为和体重等方面均无异常表现。  综上所述,饮水口服GSLS对鸡有抗氧化和免疫增强作用。GSLS可显著增加免疫器官的脏器指数、T-AOC,提高GSH、 VC和VE的水平,增强T-SOD、CAT和GSH-PX的活性,同时降低蛋白质羰基和MDA的含量。健康鸡和免疫抑制鸡饮水口服GSLS后免疫灭活苗(ND-AI)和弱毒疫苗(ND-IB),免疫器官脏器指数(脾脏、胸腺和法氏囊),血清中特异性NDV-、AIV-和IBV-抗体水平,脾脏淋巴细胞增殖反应,十二指肠IgA+细胞和上皮内淋巴细胞(iIEL)的数量显著高于不口服GSLS的对照组,和阳性药物APS比较无显著差异,以GSLS中剂量(5 mg/kg BW)效果最为显著。因此,GSLS对鸡具有抗氧化作用和免疫增强作用。
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