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大电导钙激活钾离子通道(large—conductance calcium—activated potassium channels,BKCa)广泛地存在于动物的不同组织中,并参与调节细胞的多种功能。已经证实其非正常的表达和功能紊乱与心血管疾病发病有着密切的关系。
本论文构建了BKCa通道α亚基的表达载体(pTargeT—BKca—α),并将其转染到CHO细胞中,然后对转染的CHO细胞进行持续的力学刺激;另外,对鸡心肌细胞也进行了同样的力学刺激。通过对刺激后的CHO细胞的免疫学检测和心肌细胞的膜片钳检测并进行初步分析,得出以下结果:
1.对转染了BKCa通道α亚基的CHO细胞施加12 hr(基底应变为12%)持续的力学刺激后,BKCa通道的表达量明显地增加。
2.对鸡心肌细胞施加12 hr(基底应变为12%)持续的力学刺激后,BKca通道的开放频率明显提高。
以上结果表明,当细胞处于持续张力的不利环境中,其会通过上调BKCa通道的表达量和开放频率,从整体上提高对受到力学刺激的细胞降低张力的能力。
此外,我们还构建了BKCa通道α亚基的几种突变体的表达载体,为进一步研究BKCa通道的力学门控调节机制提供了必要的实验材料。