【摘 要】
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目的利用免疫磁珠快速分离、纯化同质性成人骨髓基质干细胞。方法采集正常成人骨髓,经淋巴细胞分离液分离出骨髓单个核细胞(MNCs)并培养扩增,应用免疫磁珠从MNCs中分离出Stro
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目的利用免疫磁珠快速分离、纯化同质性成人骨髓基质干细胞。方法采集正常成人骨髓,经淋巴细胞分离液分离出骨髓单个核细胞(MNCs)并培养扩增,应用免疫磁珠从MNCs中分离出Stro-1~+细胞,对其进行形态学、生物学特性方面的测定与分析,并与传统贴壁培养法获得的BMSCs相比较。通过流式细胞仪检测Stro-1~+细胞表面标记及细胞周期分布;通过相差显微镜观察细胞形态;通过绘制细胞贴壁率曲线、生长曲线、体外扩增曲线了解其体外生长情况及扩增能力;通过诱导成骨后碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色及X线衍射分析了解其成骨能力。结果利用免疫磁珠可从成人骨髓中获取骨髓基质干细胞(BMSCs)。与贴壁法获得的BMSCs相比较,获得的细胞克隆单一,几乎无圆形细胞夹杂,贴壁率高,生长状况良好,体外扩增可达10~6～10~7数量级。免疫磁珠分离法对BMSCs细胞周期无明显影响,其分离所得的BMSCs在成骨诱导培养条件下具有良好的成骨分化能力。结论利用免疫磁珠可以得到纯度高、活性好的成人骨髓基质干细胞。
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