缺铁胁迫下小金海棠根部铁高效相关蛋白的表达及其属性鉴定

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铁是植物生长发育所必需的营养元素之一。虽然地壳中含铁丰富,但绝大多数的植物缺乏从土壤中有效吸收铁的活性机制,因而会表现出缺铁胁迫症状。缺铁将严重影响植物的生长发育,为研究耐缺铁植物的抗缺铁机制,解决植物缺铁黄化的问题,本研究以耐缺铁的苹果属植物小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为试材,通过蛋白质组学的技术 (双向电泳技术,质谱技术,生物信息学技术)手段研究缺铁胁迫下小金海棠根部蛋白质表达模式的变化情况,分离与鉴定其铁高效相关蛋白,以探明其耐缺铁的机理。将组培生根的小金海棠进行24小时和72小时的缺铁处理(0 μmol/L FeNa-EDTA),以全营养液培养(含40 μmol/L FeNa-EDTA)为对照。选取白色的初生根,采用改良的TCA/丙酮法进行总蛋白的提取。利用双向凝胶电泳技术对根部总蛋白样品进行分离,共得到700多个重复性好的蛋白点。对其中17个上调表达的蛋白点进行了MALDI-TOF质谱分析。用获得的肽质量指纹图谱数据进行蛋白质的检索与鉴定,共有13个蛋白质得到了鉴定。这些蛋白分属于11个基因的表达产物。这些与小金海棠铁高效相关的蛋白大多数为物质与能量代谢和抗逆与胁迫应答反应有关的蛋白,还有些蛋白是细胞骨架蛋白和参与膜转运的蛋白。与物质和能量代谢有关的蛋白有UDP-葡萄糖焦磷酸化酶,果糖激酶和NAD依赖的异柠檬酸脱氢酶。在基础代谢中具有重要作用的S-腺苷甲硫氨酸合成酶也得到了鉴定;与抗逆境胁迫有关的蛋白有单脱氢抗坏血酸还原酶,维生素B6合成蛋白的亚基,Pir7b蛋白和儿茶酚氧位甲基转移酶;还有参与膜转运的液泡质子ATP酶,参与细胞骨架构建的肌动蛋白及功能未知蛋白。
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