研究背景：　　特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种以皮肤粘膜出血、血小板数目减少或寿命缩短、巨核细胞数目正常或增多、脾不大为特征的获得性自身免疫性疾病，其发病机制复杂。随着新药的不断问世，ITP的总体有效率虽有明显提高，但仍有近1/3的患者远期缓解率低或无有效的治疗手段，多数转变为慢性或难治性ITP，迁延不愈。ITP患者因出血风险大、疾病转归的不可预测、对疾病的恐惧感、长时间的治疗、社会活动减少等各种因素严重影响其生活质量，甚至低于癌症患者，因此深入挖掘ITP的发病机制，积极探寻新的治疗靶点，成为提高ITP患者生活质量的重要途径。　　目的：　　目前针对ITP发病机制的研究主要集中在体液免疫或细胞免疫介导的血小板的过度破坏和/或巨核细胞生成血小板不足两方面，针对自噬导致ITP患者巨核细胞生成血小板不足的研究较少，因此，本研究分为三部分来研究ITP患者巨核细胞凋亡与自噬的关系，并进一步探讨二者相互关系的机制，为ITP的治疗提供新的视角。　　方法：　　本实验分为三个部分：　　1.收集14例ITP初诊患者，并设立对照，采集骨髓并进行涂片，采集外周血离心后获得血浆，应用瑞氏-吉姆萨染色液对骨髓涂片染色，然后镜检，进行巨核细胞分类计数，同时拍照。　　2.选取成人巨核细胞白血病Meg-01细胞代表巨核细胞，与无血清1640培养液、正常人血浆及ITP患者血浆进行共培养，瑞氏-吉姆萨液染色评估形态学改变、应用Lyso-Tracker Red、MDC法及流式细胞术检测自噬；Annexin V-FITC/PI双染法及流式细胞术检测凋亡，并应用自噬抑制剂氯喹进行自噬抑制实验阐明自噬与凋亡的关系。　　3.选取成人巨核细胞白血病Meg-01细胞代表巨核细胞，与无血清1640培养液、正常人血浆及ITP患者血浆进行共培养，应用Western blot检测Bcl-2、Bax、Beclin-1、LC3B及Cleaved caspase-3的蛋白表达，并应用自噬抑制剂氯喹进行自噬抑制后了解上述蛋白的表达情况。　　结果：　　1. ITP患者巨核细胞总数与正常对照组相比，无统计学意义；与对照组比较，ITP患者前期巨核细胞数目明显增高，且具有显著差异（P<0.01），而ITP患者后期巨核细胞数目明显降低，也具有统计差异（P＜0.05）。ITP患者颗粒巨核细胞胞浆量较少，胞浆中的颗粒细小且稀疏，而正常对照组颗粒巨核细胞胞浆量丰富，胞浆中的颗粒较粗大且浓密；ITP患者巨核细胞胞核染色质较疏松，而正常对照组染色质致密。　　2. ITP血浆组Meg-01细胞形态出现空泡化、核凝集现象明显，但以无血浆组为甚；通过荧光分析，ITP血浆组较正常血浆组凋亡明显降亡。　　3. Western blot检测显示，与正常对照组比较，无血浆组及ITP血浆组Bcl-2、Beclin-1、LC3B均增高，Bax、Cleaved caspase-3均降低。加入自噬抑制剂氯喹后，无血浆组及ITP血浆组Bcl-2、Beclin-1、LC3B均降低，Bax、Cleaved caspase-3均增高，提示ITP患者巨核细胞通过自噬抑制其正常凋亡的机制是Bcl-2通过下调bax介导的线粒体凋亡通路来实现自噬程序的切换。