杆状病毒AcMNPV体内、体外复制时基因组的变化

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wqiufeng1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  本研究以杆状病毒模式种苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(AcMNPV)的细菌人工染色体(AcBAC)为研究对象。AcBAC既能感染宿主,也可以象质粒一样在E.coli中复制,因此可简单、快速获得基因型均一的子代病毒。但AcBAC的多角体基因已被插入失活,为了使其具有口服感染性,本研究通过位点特异性重组,构建了能够产生多角体的重组病毒AcBACph作为本研究的实验材料。AcBACph在体外(Hi-5细胞和Sf-9细胞)、体内(四龄粉纹夜蛾幼虫)中进行连续传代时产生了多种子代病毒突变株。利用BAC-AcMNPV-E.coli研究平台和RFLP技术对体内、体外的第1,5,10代子代病毒进行REN分析:AcBACph在Hi-5细胞中和四龄粉纹夜蛾幼虫中连续传代后,所产生的子代病毒共有的基因组区域、基因组的平均大小、完整基因型所占比例都很相似;它们的第l代子代病毒包含较多病毒突变株,基因组序列完整的病毒株仅占6%(Hi-5)和2%(Tn幼虫),第5代的完整病毒株占52%(Hi-5)和87%(Tn幼虫),第10代的完整病毒株占82%(Hi-5)和83%(Tn幼虫)。AcBACph在Sf-9细胞中连续传代后,病毒基因组的变化模式却有所不同,第一代、第五代、第十代完整病毒株所占比例分别是:3%、2%、3%。无论在体外还是体内传代时,PstI-Dl、PstI-D2、PstI-N均存在于子代病毒基因组中。某些突变株具有超摩尔带,例如:PstI-D2、PstI-I,、PstI-J,并且这些超摩尔带均具有复制原点。应用TCID50技术检测了病毒感染细胞所产生的芽生型病毒的毒力,活体生测技术检测了病毒感染Tn幼虫产生的多角体的毒力,发现病毒群体中完整病毒的比例与病毒的毒力不呈正相关。
其他文献
本文分析了CAPP在实现过程中所遇到的难点,重点分析了CAD/CAPP集成环节中遇到的困难。提出了用全参数化方式实现CAD/CAPP集成的方法。并讨论了用全参数化CAD软件T-FLEX实现这一方法的具体步骤。 This paper
库尔特·冯内古特的这部小说,在作者独特的黑色幽默渲染下,在图画与语言的拼贴下,对美国长期存在的种族问题进行了生动描述.
课堂提问是小学数学课堂教学的重要方式之一,提问可以适时营造课堂氛围,可以及时吸引学生的注意力,也可以促使课堂教学朝着更好的方向发展.
本文利用光学显微镜和电子显微镜结合的方法研究了东亚飞蝗Locustamigratoriamanilensis前翅毛形感器的外部形态、超微结构、分布和数量,并采用免疫印迹和免疫细胞化学定位技
“互联网+”时代的到来,对小学语文教学产生了很大的影响,就语文教学也呈现出新的趋势和特点. 传统的小学语文教学模式,已经不适应这种新时代的发展. 新时代下,需要构建全新
期刊
本研究以重要储粮害虫杂拟谷盗为供试虫源,首先将丁香、丹皮、山奈、黑胡椒、肉桂、花椒、水蓼和迷迭香8种植物制粉,筛选出高效杀虫、防虫效果的植物粉剂;进而以甲醇、石油醚
词汇是英语学习的根基,要想学好英语,先要过好词汇这一关.词汇教学是小学英语教学的重头戏,直接决定着学生未来的英语学习之路是否顺利.
虽然婚恋不是福斯特小说的重要主题,但通过女主人公施莱格尔姐妹俩的感情经历这一视角,我们可以考察到作者所希望达到的理智与情感这两个对立方面的联结,姐姐玛格丽特由理智
个性化阅读能在小学语文阅读中发挥学生的主体作用,能够将学生的思维拓展开来. 通过师生之间的互动从而积极参与到课堂活动中来,将不同的个体之间的差异展现出来并进行相互理
期刊
是一首象征主义诗歌具有代性的作品,自问世以来,因其包容了深奥的意蕴,丰富的含义而倍受读者和评论家青睐,许多诗歌评论家对其做出了自己的见解.本文采取“新批评”理论的文