论文部分内容阅读
目的：探讨十字花科植物提取物莱菔子素(sulforaphene，SFE)对人肝细胞系HHL-5Ⅱ相酶的诱导作用及对肝癌细胞(HepG2)体外移植瘤的抑制作用。 方法：本研究包括离体实验和动物实验两部分。体外培养人肝细胞HHL-5，MTT法检测1-100μmol/L莱菔子素对HHL-5增殖作用的影响。在此基础上，采用蛋白印迹法(Western Blot)研究莱菔子素对HHL-5Ⅱ相酶-血红素加氧酶(HO-1)、硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、谷胱甘肽硫转移酶(GSTA1)及核因子E2相关因子2(Nrf2)的作用。采用人肝癌细胞系HepG2皮下注射，建立裸鼠肝癌移植瘤模型，将雄性BALB/C裸鼠随机分为四组(n=10)：对照组(食用油组)、莱菔子素低剂量组(E3组，3mg/kg/d)、莱菔子素高剂量组(E6组，6mg/kg/d)、莱菔硫烷组(SFN组，6mg/kg/d)。每日灌胃1次，共5周。应用TUNEL等法检测莱菔子素对移植瘤组织中细胞凋亡的影响；采用Western Blot法研究莱菔子素对移植瘤组织中Ⅱ相酶表达的影响。 结果：在离体实验中，MTT实验表明，低剂量的莱菔子素(≤20μmol/L)能促进肝细胞HHL-5增殖。莱菔子素可增加Ⅱ相代谢酶HO=1、TrxR、GSTA1蛋白的表达，莱菔子素还能诱导Nrf2蛋白在细胞核内的表达，呈明显的剂量效应关系(P<0.05)。在动物实验中，E3组、E6组和SFN组与对照组相比，均可明显抑制肿瘤生长，降低肿瘤重量和大小(P<0.05)。HE染色观察瘤组织病理变化，结果显示与对照组相比，E3组中央坏死面积最大，其次是E6组、SFN组，并有大量炎细胞浸润。TUNEL测定结果提示E6组能更好诱导癌细胞死亡(P<0.05)。同离体实验结果，莱菔子素可诱导裸鼠肝匀浆中GSTA1和HO-1蛋白表达(P<0.05)。 结论：莱菔子素通过Nrf2途径诱导HHL-5细胞中Ⅱ相酶HO-1、GSTA1、TrxR蛋白的表达：并可抑制移植瘤生长，诱导肿瘤细胞凋亡。