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背景胃癌是常见的恶性肿瘤之一,在恶性肿瘤的致死因素中排名第二。目前临床上以TNM分期和病理组织学类型(恶性程度或分化程度)来评价胃癌患者的预后,并已经成为判断恶性肿瘤预后的金标准。但是TNM分期与肿瘤进展时间密切相关,尽管肿瘤的病理学类型可以反应肿瘤的恶性程度,临床上仍缺乏肿瘤进展水平的免疫学指标,且尚无有效的分子生物学指标准确的预测胃癌患者预后。近年来有很多文献研究报道,微小RNA(micro RNAs,miRNAs)可以促进肿瘤的形成,并通过miRNAs表达谱发现正常胃粘膜组织中miRNA-195(miR-195)呈现高表达状态。但是,目前对于miR-195在胃癌发生、发展中的具体作用仍不明确,miR-195是否可以作为胃癌患者的预后判断指标值得我们进一步研究。此外,研究表明恶性肿瘤微环境中免疫性细胞如T淋巴细胞、NK细胞等分布和表达水平,可作为肿瘤患者的预后评估指标。因此,了解恶性肿瘤微环境中的免疫性T淋巴细胞的表达水平,对恶性肿瘤患者预后判断及指导化疗及免疫治疗都具有十分重要的意义。本研究旨在明确miR-195和肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)在胃癌组织中的表达与预后的相关性,探讨二者作为评价胃癌预后生物标志物的可能性,并结合患者临床资料与外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的敏感率,探讨胃癌组织中miR-195水平及TILs表达与病理特征及临床分期及预后的相关性,并评价其预测价值。目的分析miR-195与肿瘤浸润淋巴细胞CD3~+、CD4~+、CD8~+在胃癌中的表达变化及临床意义。方法(1)采用实时荧光定量pcr(real-timequantitativepolymerasechainreaction,qrt-pcr)方法分别检测mir-195在胃癌及其癌旁正常组织中的表达量,并分析其与临床病理特征关系;(2)采用免疫组化法分别检测胃癌及其癌旁正常组织中、转移淋巴结与阴性淋巴结中cd3~+、cd4~+、cd8~+t淋巴细胞,并分析其与淋巴结转移的关系;(3)采用免疫荧光原位杂交(immunefluorescenceinsitu-hybridization,imfish)检测47例胃癌患者术前外周血ctcs。结果(1)相对于癌旁正常组织,癌组织中mir-195表达下调(p<0.05);mir-195的表达与肿瘤恶性程度密切相关,恶性程度越高,mir-195的表达水平越低(p<0.05);mir-195的表达与淋巴结转移密切相关,有淋巴结转移胃癌组织中的mir-195表达明显低于无淋巴结转移的胃癌组织,且淋巴结转移越多,mir-195表达越低(p<0.05)。mir-195的表达与胃癌患者性别、年龄、t分期及m分期无关(p>0.05)。(2)受试者工作特征曲线(receiveroperatorcharacteri-sticcurve,roc曲线)分析显示对于淋巴结转移阳性的胃癌患者,最佳临界值是0.584,mir-195的敏感性是70.21%,特异性是19.61%,曲线下面积(areaundercurve,auc)为(0.772±0.096),95%可信区间(confidenceinterval,ci)为0.584~0.959。(3)kaplan-meier生存曲线分析显示mir-195低及高表达组3年中位无复发生存期(relapsefreesurvival,rfs)分别为21.1月(95%ci:19.0~23.2)和23.8月(95%ci:16.7~31.0),二者间差异无显著统计学意义(p>0.05)。(4)胃癌组织中cd3~+、cd4~+、cd8~+t淋巴细胞明显高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(p<0.05);阳性淋巴结中cd3~+、cd4~+、cd8~+t淋巴细胞明显低于阴性淋巴结,差异具有统计学意义(p<0.05);肿瘤恶性程度越高及淋巴结转移越多,胃癌组织中cd3~+、cd4~+、cd8~+t淋巴细胞计数越多,阳性淋巴结中cd3~+t淋巴细胞越多,阳性淋巴结中cd4~+、cd8~+t淋巴细胞计数越少,差异具有统计学意义(p<0.05)。(5)ctcs阳性为16例(34.04%),n0期1例,n1期1例,n2期9例,n3期5例。结论(1)胃癌组织中miR-195的表达量可能与恶性程度呈负相关。(2)胃癌组织中miR-195的表达量可能与淋巴结转移呈负相关。(3)胃癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞CD3~+、CD4~+、CD8~+表达水平和肿瘤病理分期分型呈正相关,提示可以作为独立的免疫学评价指标预测胃癌患者预后。(4)胃癌组织中miR-195和肿瘤浸润淋巴细胞的联合检测,可以兼顾恶性肿瘤特异性和其个体微环境下的免疫状态,将可能更好的评价肿瘤患者的预后。