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目的
观察基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激因子-1α(PGC-1α)/雌激素相关受体-α(ERR-α)共修饰间充质干细胞(MSCs)对血管化的影响。
方法利用基因PGC-1α和ERR-α腺病毒过表达载体修饰MSCs;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)或酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MSCs基因和促血管化细胞因子的变化;凝胶成血管实验观察MSCs对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)成血管能力的影响。
结果基因PGC-1α/ERR-α共修饰可将细胞PGC-1α的mRNA表达水平提高至原表达的6倍;PGC-1α/ERR-α共修饰MSCs的血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2、血小板源生长因子-B(PDGF-B)mRNA表达显著高于未修饰和PGC-1α修饰MSCs(VEGF:5.45±0.51,1.00±0.24,2.33±0.31,F=189.100,P=0.000;ANGPT-2:2.66±0.38,1.00±0.29,1.89±0.24,F=36.180,P=0.000;PDGF-B:4.87±0.66,1.00±0.17,2.13±0.45,F=89.060,P=0.000),其培养上清VEGF分泌量显著高于未修饰和PGC-1α修饰MSCs(F=343.700,P=0.000);与PGC-1α/ERR-α共修饰MSCs共培养HUVECs形成条索样血管结构的总长度[(82 580±3 156) μm]显著高于与未修饰[(9 130±1 174) μm]或PGC-1α修饰MSCs[(18 570±2 087) μm]的HUVECs(P=0.000)。
结论基因PGC-1α/ERR-α共修饰可有效的加强MSCs的促血管化能力,有望用于组织工程血管化。