论文部分内容阅读
目的探讨逆转录病毒介导人血管内皮抑制素基因(endostatin)对人肝癌细胞的生长抑制作用.方法利用逆转录病毒载体pLncx构建含有人endostatin基因及信号肽的重组逆转录病毒质粒,并将其导入PA317细胞制备重组病毒.用重组病毒感染人肝癌细胞SMMC7721获得稳定转人endostatin基因细胞株(SMMC-endo).同样用空白病毒质粒制备对照细胞株SMMC-pLncx.免疫组化及Western blot检测人endostatin 基因在转染细胞株中的表达和分泌.应用血管内皮细胞生长抑制试验验证转染细胞株表达的人endostatin的生物学活性.同时对转染细胞株在体内外的生长情况进行观察.结果免疫组化及Western blot印迹分析证实转染人endostatin基因的肝癌细胞能表达并分泌人endostatin.与转染空白对照组(SMMC-pLncx)相比,表达人endostatin的SMMC7721浓缩上清可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞生长,抑制率达48%,明显高于对照组10.2%(P