【摘 要】
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无细胞转录翻译系统（cell-free transcription and translation, TXTL）,简称无细胞系统,即基于细胞提取物在体外快速表达蛋白质的系统。该系统绕过了细菌转化、克隆筛选和细胞裂解等过程,更精准便捷地控制反应底物,减少细菌对蛋白质产生的影响,具有多功能性和灵活性等优点。近年来,TXTL作为一个新兴平台在clusterd regularly interspaced
【基金项目】
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国家自然科学基金（21877100,22177104）； 浙江省属高校基本科研业务费（RF-B2019003）～～；
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无细胞转录翻译系统（cell-free transcription and translation, TXTL）,简称无细胞系统,即基于细胞提取物在体外快速表达蛋白质的系统。该系统绕过了细菌转化、克隆筛选和细胞裂解等过程,更精准便捷地控制反应底物,减少细菌对蛋白质产生的影响,具有多功能性和灵活性等优点。近年来,TXTL作为一个新兴平台在clusterd regularly interspaced short palindromic repeat（CRISPR）技术研究中应用广泛,实现了对CRISPR/Cas系统快速、便捷地表征,比如高特异性的向导RNA（guide RNA,gRNA）以及抗CRISPR蛋白的筛选。同时,基于TXTL的CRISPR生物传感器与生物材料、基因回路等结合,开发并用于病原体中核酸标志物等的检测,相关试剂冻干后也提高了便携性,实现高灵敏度的即时检测（point-of-care testing,POCT）。传感器与可编程的电路元件等技术的结合为全细胞生物传感器（whole cell biosensor, WCB）提供了一种非生物的替代品,提高了生物安全性,加速了其通过监管机构的批准应用。本文重点介绍并讨论了近些年利用TXTL对CRISPR系统的表征及在生物传感器中的应用,希望能更好地推动CRISPR技术和TXTL在生物传感器方面的发展。
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