【摘 要】
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目的：构建基于数字PCR技术的食品中诺如病毒（Norovirus， NoV）定量检测方法。方法：筛选引物探针，建立并优化GI、GII型NoV和MS2噬菌体一步法微滴式数字PCR（RT-ddPCR）检测体系，确定特异性。利用NoV RNA标准物质和MS2噬菌体RNA确认RT-ddPCR检测体系的定量限、准确度和重复性。制备人工阳性样品，分析MS2噬菌体对定量结果的影响。结果：三个RT-ddPCR检测
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目的：构建基于数字PCR技术的食品中诺如病毒（Norovirus， NoV）定量检测方法。方法：筛选引物探针，建立并优化GI、GII型NoV和MS2噬菌体一步法微滴式数字PCR（RT-ddPCR）检测体系，确定特异性。利用NoV RNA标准物质和MS2噬菌体RNA确认RT-ddPCR检测体系的定量限、准确度和重复性。制备人工阳性样品，分析MS2噬菌体对定量结果的影响。结果：三个RT-ddPCR检测体系具有良好的特异性、准确度和重复性，NoV RT-ddPCR检测体系的定量限包含104 ～ 100（拷贝/μL）五个数量级，MS2噬菌体RT-ddPCR检测体系定量限与NoV相当，添加与不添加MS2噬菌体的人工阳性样品的定量结果没有显著性差异（P≥0.05）。结论：NoV RT-ddPCR检测体系可准确定量NoV RNA，MS2噬菌体不影响定量结果，可作为过程控制的模式病毒被添加到食品中，指示回收率，计算食品中NoV实际载量。
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