毛白杨形成层总蛋白裂解及蛋白含量测定方法优化

来源 :河北农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:koala01250708
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通过TCA/丙酮法研磨提取获得毛白杨形成层总蛋白质粉末。在室温和冰浴条件下,用不同的裂解液对粗提总蛋白进行裂解,分别在1,2及3h取出裂解蛋白液。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向电泳对蛋白质裂解情况进行检测、比较与分析,获得了蛋白质最适裂解条件为:蛋白裂解液(8mol/L尿素,2mol/L硫脲,4%CHAPS,65mmol/LDTT,2%Bio—lyte)在室温条件裂解3h。同时对蛋白质含量测定方法-Bradford法及2种改良的Bradford方法进行了比较,最终获得了用裂解缓冲液配制蛋白质标准曲线系列溶液
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