【摘 要】
：
目的开发能够用于检测HPV16、HPV18感染的诊断技术,原核表达HPV16E6、18E6重组蛋白,制备相应的单克隆抗体,为建立HPV的诊断方法提供物质基础。方法BL21-PET28a-16E6、BL21-PE
【机 构】
：
苏州科技城医院检验科,南京医科大学附属苏州医院检验科
【基金项目】
：
苏州高新区医疗卫生科技计划项目(2016Q006)
论文部分内容阅读
目的开发能够用于检测HPV16、HPV18感染的诊断技术,原核表达HPV16E6、18E6重组蛋白,制备相应的单克隆抗体,为建立HPV的诊断方法提供物质基础。方法BL21-PET28a-16E6、BL21-PET28a-18E6工程菌株由该实验室前期构建,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导HPV16E6、18E6重组蛋白表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)、蛋白质免疫印迹法(Western blot)对HPV16E6、18E6重组蛋白进行鉴定,His亲和层析柱对目的蛋白进行纯化。以纯化的重组蛋白HPV16E6、18E6为免疫原免疫BALB/c小鼠,杂交瘤技术制备相应单克隆抗体,间接法测抗体,酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测抗体效价,Western blot检测抗体特异性。结果表达并纯化获得了HPV16E6、18E6蛋白,杂交瘤技术获得HPV16E6-2-G9、HPV16E6-2-F2、HPV18E6-3-H1杂交瘤细胞株,Western bolt结果显示,其分泌抗体可分别与HPV16E6、18E6特异性结合,用HPV16E6-2-G9、HPV18E6-3-H1制备的腹腔积液效价分别可达106。结论成功制备抗HPV16E6、18E6单克隆抗体,该抗体效价高,特异度好,为建立血清学诊断方法打下了基础。
其他文献
钻石大王亨利·彼得森在谈到职场的用人之道时,曾经意味深长地说道：＂一个在问题面前轻易选择放弃的人,不可能胜任任何一份工作。＂在工作中,我们常常会遇到各种各样的问题,一
【目的】了解河北省卢龙县轮状病毒(rotavious,RV)和诺如病毒(norovirus,NV)肠道感染临床特点及发生肠道外损害的状况,为临床治疗婴幼儿病毒性腹泻提供科学依据。【方法】应
江西省是竹资源大省,拥有5个"中国竹子之乡",竹产业是江西省林业的传统支柱产业。文章在深入调研5个竹乡竹产业发展的基础上,分析了江西省竹产业发展存在的问题,并对加快江西
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”＄ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’＃陈川个美食
Back to yield
中学生课堂参与式阅读教学是一种有准备的合作式或协作式的语文教学。这种方法以学习者为中心,充分利用灵活多样的教学手段,鼓励学习者积极参与到阅读教学过程,加强教学者与
语文教材中编制的口语交际内容作为口语交际课程和教学实施的物质载体,它在培养学生口语交际能力的过程中发挥着重要作用。研究语文教材中的口语交际板块的编制,对完善教材内
日前，李威刚刚结束新剧《小孩大人》在台湾的拍摄工作，便马不停蹄赶回内地，投入到在便门拍摄的一部新戏当中。剧中，李威将以崭新的短发形象亮相，不过具体参演怎样的剧集、饰演什么
对QUl20起重机钢轨铸坯以及成品进行宏观观察、成品低倍检验、化学成分分析、力学性能测试、显微组织及夹杂物含量测量、表面硬度及脱碳层检测。检测结果表明，只有提高连铸坯
语言态度是人们心理和情感态度的直接反映,是人们进行语言交际的重要表现,也是语言活动的核心,但是语言态度的表现形式繁多且各有不同。文章通过对新疆少数民族中学生语言态
自21世纪以来,语文文学教育领域在认识层面上已经意识到了要以学生为主体,尊重学生的主观能动性,然而,在实际的教学实践中,广大一线的教师却很难摆脱实用文教学的圈子。针对