【摘 要】
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目的建立抗BP180NC16A IgE抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法，评价其在大疱性类天疱疮（BP）诊断中的意义。方法采用pGEX-2T原核表达GST-BP180NC16A融合蛋白，并用谷胱甘肽亲和层析法进行纯化。采用棋盘滴定法确定抗原包被浓度，明确二抗及待测标本最佳稀释度，确定最佳实验条件。对2011年2月至2012年10月就诊于北京协和医院的56例BP患者、24名健康对照以及18例
【机 构】
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100730中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科,100730中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科,100730中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科,100730中国医学
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目的建立抗BP180NC16A IgE抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法，评价其在大疱性类天疱疮（BP）诊断中的意义。
方法采用pGEX-2T原核表达GST-BP180NC16A融合蛋白，并用谷胱甘肽亲和层析法进行纯化。采用棋盘滴定法确定抗原包被浓度，明确二抗及待测标本最佳稀释度，确定最佳实验条件。对2011年2月至2012年10月就诊于北京协和医院的56例BP患者、24名健康对照以及18例天疱疮、1例Stevens-Johnson综合征（SJS）患者血清进行检测，根据受试者工作特征（ROC）曲线确定最优阳性界值并评价其敏感度和特异度。
结果确定抗原包被浓度为500μg/ml、酶标二抗最佳稀释倍数为1：1000，血清标本采用原液及1：10为最佳实验条件。根据ROC曲线判断最优阳性界值为0.549，实验的敏感度为71.4%、特异度为100%。天疱疮和SJS患者血清中此抗体均为阴性。
结论抗BP180NC16A IgE抗体检测方法具有较高的特异度以及相对较高的敏感度，在BP的诊断及发病机制的研究中具有重要意义。
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