牛凝乳酶原基因在毕赤酵母中的表达及其酶学特性的研究

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凝乳酶是制造干酪的关键酶。为获得高活性的牛凝乳酶(chymosin,B—chy),用电脉冲法将线性化的pGAPZctA—B—pchy重组表达载体转化到毕赤酵母GS115中。该菌株在以葡萄糖为碳源的YPD培养基中可分泌表达牛凝乳酶原。SDS—PAGE分析表明所表达的牛凝乳酶,分子量约为37ku,符合预期大小。发酵培养96h后,酶活力达到96SU/mL。酶学特性分析表明,其最适凝乳温度为60℃,在pH2~6、小于50℃的温度范围内稳定。Ca2+浓度为40mmol/L时,钙促酶反应活性达到最高,此后随着Ca2+
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