苹果酰基辅酶A结合蛋白4基因MpACBP4的克隆及功能鉴定

来源 :植物生理学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qyxiao3771
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为明确苹果(Maluspumila)MpACBP4基因在非生物胁迫中的功能,本研究从苹果砧木M26中克隆得到rnMpACBP4基因(GenBankNo.MG878871.1).该基因长度为2 016 bp,编码671个氨基酸,等电点为5.37.MpACBP4是非分泌蛋白,无信号肽,具有4个保守功能结构域,5个KELCH β折叠结构基序.将MpACBP4与其他9种植物中ACBP4蛋白的氨基酸序列进行比对,发现总体相似度达到81%以上,说明MpACBP4是高度保守的蛋白质.进化关系显示,MpACBP4蛋白与梨(Pyrus)的亲缘关系最近.qRT-PCR结果显示,MpACBP4基因在不同干旱(轻度、中度、重度)胁迫下均有响应.为进一步鉴定其功能,构建了MpACBP4基因的过表达载体,并通过农杆菌介导遗传转化法获得转基因Micro-Tom番茄,进行聚乙二醇6000(PEG6000)胁迫处理.试验结果显示:转基因植株种子的萌芽率是野生型的56%,过氧化氢酶(CAT)活性是野生型的58%,相对电导率是野生型的1.3倍左右.以上结果说明苹果MpACBP4基因可能参与逆境胁迫响应.
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