聚乙烯亚胺转基因影响因素的测定及其优化

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyang137963
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
聚乙烯亚胺 (PEI)为阳离子多聚物 ,可浓缩DNA形成纳米级颗粒 ,作为基因释放载体转染真核细胞 .选用Mr2 5 0 0 0 ,分枝状的聚乙烯亚胺转染质粒 ,比较多种转基因效率的影响因素 .通过MTT法测定PEI对COS 7细胞的细胞毒性 .利用电泳阻滞实验测定PEI与DNA形成复合物时所需的比例 .通过PEI转染增强型绿色荧光蛋白的pEGFP质粒、编码β 半乳糖苷酶的pSVβ质粒 ,探索氯喹、白蛋白、血清、盐离子浓度、质粒剂量、细胞数量等对聚乙烯亚胺转基因效率的影响 .实验发现 ,PEI对细胞的毒性作用与剂量相关 .PEI DNA的N P比在 3 0以上方可完全结合DNA .溶酶体抑制剂氯喹可增加转染效率 .培养液中的白蛋白、血清会降低转染效率 .生理盐溶液作为配制PEI DNA复合物的溶媒 ,转染效率高于 5 %葡萄糖作为溶媒 .随着转染质粒剂量的增加 ,转染效率呈剂量依赖正效应 .聚乙烯亚胺是有效的体外真核细胞转染剂 ,可用于合成更复杂的基因释放载体 .
其他文献
目的:探讨护理干预对预防糖尿病足溃疡的作用。方法:将188例发生足溃疡的低、中、高危患者根据教育阶段不同分为A、B、C3组,分别在足溃疡发生的前期、发生期和后期予以护理干
随着我国教育体制的不断改革,高等院校数量的逐渐增多使大学生数量也在不断上涨,这就导致大学生就业形势成为了人们关注的热点之一。本文从大学生的就业现状出发,分析大学生
目的了解老年高血压患者疾病家庭负担状况及其影响因素,为临床老年高血压患者及其照顾者的整体护理提供实证依据。方法利用一般资料调查条目和疾病家庭负担量表,对老年高血压
预应力岩土锚固技术是深基坑、地下工程、隧道、道路边坡、坝基、桥梁等工程中重要的支护手段之一 ,全面剖析了这项技术在理论研究、应用领域、规模、标准化建设、锚固材料及
近几年来全国各地数学中考试题中一次函数解答题出现很多变化和创新题目.本文就此类解答题中的典型特征与解题策略作一汇总,以期对同仁有所借鉴.
概述NASA宇航项目系统工程过程中的AIT(总装、测试和试验),从总装、测试、试验以及技术保证等方面对NASA、MIL等与AIT相关的标准进行了综合分析,得到几点启示。
从局部地形揭示植物种群的空间分布、年龄组成与个体迁移,可深入揭示种群动态与适应潜力,为制定有效的保育措施提供依据。笔者选取海南岛高山特有附生石上、局域种群界限清晰
利用自组装方法在铜表面制备十二烷基硫醇单层膜,采用失重法、电化学极化曲线法和交流阻抗法,研究在不同成膜时间条件下得到的自组装膜在0.51 mol/L的NaCl溶液中对铜的缓蚀作
目的探索Erbin表达缺失导致Her2阳性的人乳腺癌细胞MDA-453对曲妥珠单抗敏感性的影响。方法设计、构建含人Erbin基因特异性的短发夹RNA(shRNA)及对照shRNA的干扰载体,转染MDA