【摘 要】
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目的 :研究磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)信号通路及其中重要组分糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)对蛋白磷酸酯酶2A(protein
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目的 :研究磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)信号通路及其中重要组分糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)对蛋白磷酸酯酶2A(protein phosphotase 2A,PP2A)甲基化修饰的调节。方法 :用分子生物学及药物学手段改变Hep G2和HEK-293T细胞中PI3K信号通路及此通路中重要分子GSK-3β的活性,用Western blots分析PI3K信号通路及GSK-3β活性改变对PP2A的催化亚基-C亚基(catalytic subunit C,PP2A-C)甲基化修饰的影响。采用GSTpull down探讨PP2A-C特异性的亮氨酸甲基转移酶(leucine carboxyl methyltransferase-1,LCMT-1)与GSK-3β之间是否存在相互作用。结果:用LY294002下调细胞的PI3K信号通路,促进PP2A-C的甲基化。用GSK-3β抑制剂AR-A014418处理细胞抑制PP2A-C的甲基化。GSK-3β的GST融合蛋白GST-GSK-3β可以pull down LCMT-1。结论 :PI3K信号通路参与PP2A催化亚基甲基化的调节,抑制GSK-3β减少PP2A-C的甲基化修饰。GSK-3β与LCMT-1存在相互作用,GSK-3β可能通过LCMT-1,调节PP2A-C的甲基化修饰,进而影响PP2A的活性。
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