利用cDNA - AFLP技术分离棉花抗枯萎病相关基因

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目的:分离出棉花抗枯萎病基因片段,并Blast分析其差异片段。方法:以抗枯萎病的棉花品种中棉12号为材料,采用苗期水培方法于三叶期进行枯萎病菌诱导处理,以不接菌为对照。用64对选择性扩增引物对诱导处理和对照的cDNA进行AFLP分析。结果:得到25个阳性差异片段,在GenBank中进行同源性序列比对,24个片段在GenBank数据库中发现同源序列,有1个功能未知。结论:作物的抗病机理复杂,涉及物质和能量代谢,信号传导,逆境响应及蛋白功能调控等方面。 OBJECTIVE: To isolate the Fusarium wilt resistance gene of cotton and to analyze its differential fragments by Blast. Methods: F20 resistant cotton cultivar Zhongmian 12 was used as material to induce Fusarium oxysporum f.sp. 64 pairs of selective amplification primers were used to perform AFLP analysis of the induced and control cDNAs. RESULTS: Twenty-five positive differential fragments were obtained, and homology sequences were aligned in GenBank. The homologous sequences of 24 fragments were found in GenBank database, and one of them was unknown. Conclusion: The crop disease resistance mechanism is complex and involves the aspects of material and energy metabolism, signal transduction, adversity response and protein function regulation.
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