【摘 要】
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目的:构建人pEGFP—C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测
【机 构】
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南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏科
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目的:构建人pEGFP—C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin。结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒.HEK293细胞不表达NPHS2基因.转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin。结论:成功构建重组人pEG
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