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摘 要：本实验对大柴胡颗粒的质量标准进行研究。含量测定方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），甲醇-0.01%磷酸溶液（60：40）（用三乙胺调PH为3.0）为流动相，检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃；鉴别方法：点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板，以氯仿-甲醇-水（80：25：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，置日光及紫外光灯（365nm）下检视。结论：本法简便、准确，可用于大柴胡颗粒的质量标准研究。
关键词：大柴胡颗粒；质量；标准
大柴胡颗粒是中药类型的颗粒剂，由柴胡、黄芩、大黄、枳实（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大枣组成。大柴胡颗粒用于因少阳不和、肝胆湿热所致的右上腹隐痛或胀满不适、口苦、舌红苔黄腻、脉弦数或弦滑，胆囊炎见上述证候者。大柴胡颗粒对小鼠经热板法和醋酸致扭体引起的疼痛反应有对抗作用，还可以增加正常大鼠胆汁流量、增加胆管阻塞模型大鼠胆汁流量。柴胡始载于《神农本草经》，列为上品，用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱落、月经不调。柴胡具疏肝利胆、疏气解郁、散火之功效。《日华子本草》记载：“补五劳七伤，除烦止惊，益气力，消痰止嗽，润心肺，添精补髓，天行温疾热狂乏绝，胸胁气满，健忘。”柴胡含有柴胡皂苷（saikosapoins a、b、c、d）、柴胡酮醇、柠檬烯（Limonene）、月桂烯（Myrcene）、长叶烯（Longi-folene）、己酸（Caproic acid）、庚酸（Heptylic acid）、辛酸（Caprylic acid）、壬酸（Pelargonic acid）、2-壬烯酸（2-Nonenic acid）、苯酚（Phenol）、γ-辛酸內酯（γ-Decalac-tone）、玛索依内酯（Messoia lactone）等。本实验对大柴胡颗粒的质量标准进行研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器：半自动点样仪LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；ZXTA-20双极反渗透实验室超纯水机（北京卓信博澳仪器有限公司）；WC-52B1精密恒温槽（上海思尔达科学仪器有限公司）；YL9100液相色谱仪（汕头市科毅仪器设备有限公司）；赛默飞Spectronic 200可见分光光度计（百道亨仪器设备（北京）有限公司）；JA&D艾安得HR-250A经济型分析天平（广州市艾安得仪器有限公司）；DTA-27多功能静音型台式超声波清洗机（鼎泰（湖北）生化科技设备制造公司）；MPC-K6s 加热制冷型恒温水浴油浴（北京赛美思仪器设备有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：黄芩苷
1.4 试剂：甲醇（杭州萧山创益化工仪器有限公司）、磷酸（北京索莱宝科技有限公司）、三乙胺（北京索莱宝科技有限公司）、冰醋酸（北京索莱宝科技有限公司）、正丁醇（北京索莱宝科技有限公司）、氯仿（北京索莱宝科技有限公司）。
1.5 试药：大柴胡颗粒
2 质量标准
2.1 性状：本品为棕黄色颗粒，气香，味酸，微苦。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-6]。流动相：甲醇-0.01%磷酸溶液（60：40）（用三乙胺调PH为3.0）为流动相，检测波长：280nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于2000。
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备
取大柴胡颗粒适量，加20毫升水超声提取5分钟，过滤，蒸干滤液，残渣加甲醇溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得。
2.2.4 专属性试验
取柴胡、大黄、枳实（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大枣等药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.2.5 精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.89%，表明本方法精密度良好。
2.2.6 对照品的线性考察
精密称取适量黄芩苷对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含10微克、20微克、30微克、40微克、50微克、60微克、120微克的溶液。分别精密上述溶 液吸取20μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，黄芩苷在10～120μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
3 鉴别
取大柴胡颗粒适量，加水20毫升，超声处理5分钟，滤过，用水饱和过的正丁醇萃取3次，每次20毫升，合并正丁醇，水浴蒸干后的残渣，再溶于甲醇2ml中，作为供试品溶液。取柴胡对照药材2g，加20毫升正丁醇回流提取1小时，水浴蒸干正丁醇，残渣再溶于甲醇2ml中，作为对照药材溶液。取大黄、枳实（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大枣等药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述方法制成阴性对照样品。吸取上述溶液，分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板，以氯仿-甲醇-水（80：25：2）为展开剂，置用展开剂预饱和15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，置日光及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，而阴性对照无干扰。
4 结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于大柴胡颗粒中黄芩苷的含量测定。该鉴别方法专属性强，操作简单，可用于大柴胡颗粒中柴胡的鉴别。
参考文献
[1]邓丽红，谢臻，陈勇，李耀华，庞婷.基于三黄泻心汤的黄芩-大黄-黄连不同剂量配伍对黄芩苷和汉黄芩苷溶出的影响[J].中国药房，2018（03）.
[2]彭易兰，刘云华，黄志芳，刘玉红，陈燕，易进海.UV和HPLC法测定黄芩黄酮总苷元提取物中总黄酮和3种主要成分的含量[J].天然产物研究与开发，2015（07）.
[3]缪晓素，宋国虎，刘容秀，李小丽，徐亮，王文全，张学文，魏胜利.不同栽培年限及采收期对黄芩药材有效成分含量的影响研究[J].中国现代中药，2015（08）.
[4]龙月红，邢朝斌，劳凤云，何闪，梁能松，李宝财.高效液相色谱测定不同生境黄芩中的黄芩苷[J].中国实验方剂学杂志，2012（06）.
[5]鞠康，刘耀武，王甫成.不同产地黄芩中黄芩苷含量的测定[J].绥化学院学报，2016（08）.
关键词：大柴胡颗粒；质量；标准
大柴胡颗粒是中药类型的颗粒剂，由柴胡、黄芩、大黄、枳实（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大枣组成。大柴胡颗粒用于因少阳不和、肝胆湿热所致的右上腹隐痛或胀满不适、口苦、舌红苔黄腻、脉弦数或弦滑，胆囊炎见上述证候者。大柴胡颗粒对小鼠经热板法和醋酸致扭体引起的疼痛反应有对抗作用，还可以增加正常大鼠胆汁流量、增加胆管阻塞模型大鼠胆汁流量。柴胡始载于《神农本草经》，列为上品，用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱落、月经不调。柴胡具疏肝利胆、疏气解郁、散火之功效。《日华子本草》记载：“补五劳七伤，除烦止惊，益气力，消痰止嗽，润心肺，添精补髓，天行温疾热狂乏绝，胸胁气满，健忘。”柴胡含有柴胡皂苷（saikosapoins a、b、c、d）、柴胡酮醇、柠檬烯（Limonene）、月桂烯（Myrcene）、长叶烯（Longi-folene）、己酸（Caproic acid）、庚酸（Heptylic acid）、辛酸（Caprylic acid）、壬酸（Pelargonic acid）、2-壬烯酸（2-Nonenic acid）、苯酚（Phenol）、γ-辛酸內酯（γ-Decalac-tone）、玛索依内酯（Messoia lactone）等。本实验对大柴胡颗粒的质量标准进行研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器：半自动点样仪LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；ZXTA-20双极反渗透实验室超纯水机（北京卓信博澳仪器有限公司）；WC-52B1精密恒温槽（上海思尔达科学仪器有限公司）；YL9100液相色谱仪（汕头市科毅仪器设备有限公司）；赛默飞Spectronic 200可见分光光度计（百道亨仪器设备（北京）有限公司）；JA&D艾安得HR-250A经济型分析天平（广州市艾安得仪器有限公司）；DTA-27多功能静音型台式超声波清洗机（鼎泰（湖北）生化科技设备制造公司）；MPC-K6s 加热制冷型恒温水浴油浴（北京赛美思仪器设备有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：黄芩苷
1.4 试剂：甲醇（杭州萧山创益化工仪器有限公司）、磷酸（北京索莱宝科技有限公司）、三乙胺（北京索莱宝科技有限公司）、冰醋酸（北京索莱宝科技有限公司）、正丁醇（北京索莱宝科技有限公司）、氯仿（北京索莱宝科技有限公司）。
1.5 试药：大柴胡颗粒
2 质量标准
2.1 性状：本品为棕黄色颗粒，气香，味酸，微苦。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-6]。流动相：甲醇-0.01%磷酸溶液（60：40）（用三乙胺调PH为3.0）为流动相，检测波长：280nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于2000。
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备
取大柴胡颗粒适量，加20毫升水超声提取5分钟，过滤，蒸干滤液，残渣加甲醇溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得。
2.2.4 专属性试验
取柴胡、大黄、枳实（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大枣等药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.2.5 精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.89%，表明本方法精密度良好。
2.2.6 对照品的线性考察
精密称取适量黄芩苷对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含10微克、20微克、30微克、40微克、50微克、60微克、120微克的溶液。分别精密上述溶 液吸取20μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，黄芩苷在10～120μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
3 鉴别
取大柴胡颗粒适量，加水20毫升，超声处理5分钟，滤过，用水饱和过的正丁醇萃取3次，每次20毫升，合并正丁醇，水浴蒸干后的残渣，再溶于甲醇2ml中，作为供试品溶液。取柴胡对照药材2g，加20毫升正丁醇回流提取1小时，水浴蒸干正丁醇，残渣再溶于甲醇2ml中，作为对照药材溶液。取大黄、枳实（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大枣等药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述方法制成阴性对照样品。吸取上述溶液，分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板，以氯仿-甲醇-水（80：25：2）为展开剂，置用展开剂预饱和15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，置日光及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，而阴性对照无干扰。
4 结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于大柴胡颗粒中黄芩苷的含量测定。该鉴别方法专属性强，操作简单，可用于大柴胡颗粒中柴胡的鉴别。
参考文献
[1]邓丽红，谢臻，陈勇，李耀华，庞婷.基于三黄泻心汤的黄芩-大黄-黄连不同剂量配伍对黄芩苷和汉黄芩苷溶出的影响[J].中国药房，2018（03）.
[2]彭易兰，刘云华，黄志芳，刘玉红，陈燕，易进海.UV和HPLC法测定黄芩黄酮总苷元提取物中总黄酮和3种主要成分的含量[J].天然产物研究与开发，2015（07）.
[3]缪晓素，宋国虎，刘容秀，李小丽，徐亮，王文全，张学文，魏胜利.不同栽培年限及采收期对黄芩药材有效成分含量的影响研究[J].中国现代中药，2015（08）.
[4]龙月红，邢朝斌，劳凤云，何闪，梁能松，李宝财.高效液相色谱测定不同生境黄芩中的黄芩苷[J].中国实验方剂学杂志，2012（06）.
[5]鞠康，刘耀武，王甫成.不同产地黄芩中黄芩苷含量的测定[J].绥化学院学报，2016（08）.