【摘 要】
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目的探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在胃癌AGS细胞衰老过程中的作用及其相关的机制。方法胃癌AGS细胞，慢病毒转染沉默EZH2基因，衰老相关性β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色，计数细胞异染色质位点(SAHF)数目，计数细胞核增殖抗原(Ki-67)检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期，实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及West
【机 构】
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目的探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在胃癌AGS细胞衰老过程中的作用及其相关的机制。
方法胃癌AGS细胞，慢病毒转染沉默EZH2基因，衰老相关性β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色，计数细胞异染色质位点(SAHF)数目，计数细胞核增殖抗原(Ki-67)检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期，实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot检测p21和p53表达水平。
结果沉默EZH2后，胃癌细胞SA-β-gal染色阳性率及SAHF阳性细胞百分比增加，SA-β-gal染色阳性率从(4.83±0.71)%增加至(35.22±2.67)%，而SAHF阳性细胞百分比从(5.20±1.48)%增加至(25.68±2.53)%；流式细胞检测显示细胞周期阻滞在G0/G1期，对照组为(41.20±3.70)%，沉默EZH2后增加至(57.60±2.97)%；p21和p53表达水平明显上调，其mRNA相对表达水平分别为对照组的(2.18±0.29)倍及(3.06±0.28)倍。加入mTOR抑制剂雷帕霉素处理EZH2沉默细胞，可见SA-β-gal染色阳性率及SAHF阳性细胞所占百分比明显下降，分别由(40.06±3.89)%降至(26.44±3.82)%和(32.38±3.89)%降至(20.48±3.44)%；流式细胞计数提示G0/G1期、S期和G2/M期细胞百分比均发生显著变化，G0/G1期细胞百分比分别为(27.15±3.16)%和(56.03±5.29)%，S期细胞百分比分别为(50.63±2.97)%和(32.25±3.35)%，而G2/M期细胞百分比分别为(44.28±3.16)%和(28.37±3.17)%。
结论沉默EZH2能够通过调控p53、p21蛋白促进胃癌细胞衰老，细胞周期相关蛋白引起周期停滞后，需要mTOR相关信号通路驱动衰老转化。
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