探讨靶向沉默Notch 1、2和3基因对动脉粥样硬化患者巨噬细胞内Notch信号通路关键基因Delta－like 4(DLL4)、Jagged 1和核因子－κB(NF－κB)信号通路关键基因IκBα、p52表达的影响，从基因层面研究防治动脉粥样硬化的方法。
方法采集冠状动脉粥样硬化患者静脉血后体外分离单核细胞，并诱导转化为巨噬细胞。将巨噬细胞分为5组：空白对照组(未转染siRNA)、阴性对照组(转染NC－siRNA)、Notch1－siRNA组(转染Notch1－siRNA)、Notch2－siRNA组(转染Notch2－siRNA)和Notch3－siRNA组(转染Notch3－siRNA)。分别采用RT－PCR和Western blot法检测各组DLL4、Jagged 1、IκBα和p52的mRNA和蛋白相对表达水平，采用电泳迁移率变动分析(EMSA)检测各组NF－κB活性，采用免疫荧光法检测各组巨噬细胞内p52的分布。
结果(1)RT－PCR和Western blot检测显示，Notch1－siRNA组、Notch2－siRNA组和Notch3－siRNA组DLL4、Jagged 1和p52的mRNA和蛋白相对表达水平均低于空白对照组和阴性对照组，而IκBα的mRNA和蛋白相对表达水平均高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05或0.01)；Notch1－siRNA组DLL4、Jagged 1和p52的mRNA和蛋白相对表达水平均低于Notch2－siRNA组和Notch3－siRNA组，IκBα的mRNA和蛋白相对表达水平均高于Notch2－siRNA组和Notch3－siRNA组(P<0.05或0.01)；空白对照组和阴性对照组DLL4、Jagged 1、IκBα和p52的mRNA和蛋白相对表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。(2)EMSA检测提示，Notch1－siRNA组(613±57)、Notch2－siRNA组(1 169±85)和Notch3－siRNA组(1 454±90)的NF－κB活性均低于空白对照组(2 642±115)和阴性对照组(2 407±100) (P均<0.01)；Notch1－siRNA组的NF－κB活性低于Notch2－siRNA组和Notch3－siRNA组，Notch2－siRNA组的NF－κB活性低于Notch3－siRNA组(P均<0.01)；空白对照组和阴性对照组的NF－κB活性差异无统计学意义(P>0.05)。(3)巨噬细胞核内和胞浆内NF－κB/p52蛋白的总荧光强度Notch1－siRNA组、Notch2－siRNA组和Notch3－siRNA组均低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.01)，且Notch1－siRNA组、Notch2－siRNA组和Notch3－siRNA组细胞核内的荧光强度均低于核外(P<0.01或0.05)。空白对照组和阴性对照组细胞核内外的NF－κB/p52蛋白荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。
结论冠状动脉粥样硬化患者巨噬细胞中Notch信号通路与NF－κB信号通路之间存在正向调节，Notch1基因较Notch2和Notch3基因对NF－κB信号通路的调节作用更显著。