Akt的PH结构域与其调节区的结合

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jxx168jxx168

【摘要】

：

目的从人T细胞中克隆Akt的PH结构域及其调节区基因并进行6-his和GST融合表达,研究二者的体外结合情况,为进一步研究Akt的调节区在其分子激活中的作用打下基础. 方法以RT-PCR

【作者】

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季少平沈岚王吉村刘新平药立波

【机构】

：

第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

【出处】

：

第四军医大学学报

【发表日期】

：

2002年22期

【关键词】

：

蛋白质构象蛋白激酶B T细胞 RT-PCR技术Akt PH结构域调节区 protein kinases protein conformation

【基金项目】

：

国家杰出人才基金，国家自然科学基金

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目的从人T细胞中克隆Akt的PH结构域及其调节区基因并进行6-his和GST融合表达,研究二者的体外结合情况,为进一步研究Akt的调节区在其分子激活中的作用打下基础. 方法以RT-PCR的方法从人T细胞中扩增目的基因片段,测序证明序列正确. 再将正确的目的基因片段定向克隆到表达载体pRSET-A 和pGEX-4T-1中. 以IPTG诱导,获得Akt的PH结构域及其调节区与6-his和GST的融合表达. 表达的PH结构域融合蛋白经谷胱甘肽耦联的琼脂糖珠纯化,以pull-down法检测该PH结构域与6-his

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