【摘 要】
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目的构建弓形虫速殖子λ噬菌体展示文库,为后期免疫筛选做准备。方法通过Trizol试剂提取弓形虫RH株速殖子总RNA,再利用SMART技术进行反转录合成双链cDNA。对cDNA进行纯化后,
【机 构】
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河北北方学院医学检验学院病原生物学教研室
【基金项目】
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河北省高等学校科学技术研究项目(No.Z2017025),河北北方学院创新人才培育项目(No.CXRC1326)
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目的构建弓形虫速殖子λ噬菌体展示文库,为后期免疫筛选做准备。方法通过Trizol试剂提取弓形虫RH株速殖子总RNA,再利用SMART技术进行反转录合成双链cDNA。对cDNA进行纯化后,通过Sfi I酶切消化双链cDNA并切胶回收,与λTripIEx2载体的两臂连接,最后通过λ噬菌体包装蛋白进行体外包装,以构建λ噬菌体展示文库。对文库进行滴度测定,并进行重组率检测。结果RNA提取结果良好,未扩增文库滴度为8.0×10^6 pfu·mL^-1,文库重组率为95%。随机挑取50个噬菌斑进行
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