类弹性蛋白多肽-红色荧光蛋白融合蛋白的表达纯化及细胞相容性

来源 :北华大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：JAVA01

【摘要】

：

目的构建携带红色荧光蛋白(mCherry)标签的类弹性蛋白(ELP)原核表达载体,并表达纯化ELPmCherry融合蛋白,探讨ELP-mCherry融合蛋白与细胞的相容性.方法对利用限制性内切酶Xba

【作者】

：

刘宁崔梅英王明月杨泽斌王浩毛禹方楷漪夏薇关新

【机构】

：

北华大学医学技术学院

【出处】

：

北华大学学报:自然科学版

【发表日期】

：

2021年1期

【关键词】

：

类弹性蛋白多肽红色荧光蛋白原核表达蛋白纯化细胞相容性 elastin-like polypeptide mCherry prokaryotic expr

【基金项目】

：

吉林省科技发展计划项目(20180101213JC),吉林省人才开发资金项目(201858),吉林省教育厅科学技术研究项目(JJKH20200033KJ),吉林省卫生计生青年科技骨干培养计划项目(2017Q040),吉林市科技创新发展计划项目(201831729),北华大学青年科研创新团队项目.

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目的构建携带红色荧光蛋白(mCherry)标签的类弹性蛋白(ELP)原核表达载体,并表达纯化ELPmCherry融合蛋白,探讨ELP-mCherry融合蛋白与细胞的相容性.方法对利用限制性内切酶Xba I和Xho I对mCherry质粒和pET28a-ELP载体同时进行双酶切,将酶切产物回收、连接并转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,构建重组质粒pET28a-ELP-mCherry;将重组质粒转化到BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中,诱导表达ELPmCherry融合蛋白;利用可逆转变循环(ITC)法对EL

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