用PCR插入突变法扩增和克隆HIV-env282肽基因

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:BONNIE111
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本文报道借助于微机分析设计并合成了2个引物,通过聚合酶链反应插入突变法扩增出含有4个功能区(T肽区,与NLK部分同源区,显性中和位点及与CD4结合区)的HIV-env282肽基因,其5′端连有EcoRⅠ酶切位点和翻译起始码,3′端与终止码和BamHⅠ酶切位点相连。通过基因重组将其插入到大肠杆菌表达载体pBV220内并转化至宿主菌DH5α中,经电泳初筛、酶切分析和PCR鉴定,确定了一株含目的基因的重组菌,称之为pXW1。

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