【摘 要】
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背景中风是严重危害人体健康的心脑血管系统疾病之一，具有高患病率、高致残率和高致死率的特征。牡丹皮是毛茛科植物牡丹干燥根皮，具有清热凉血、活血化瘀之功效。丹皮酚是牡丹皮的主要活性成分，已有研究证实在缺糖缺氧条件下，丹皮酚对神经元有一定保护作用。目的 观察丹皮酚对大脑中动脉缺血（MCAO）模型小鼠的干预效果，探究丹皮酚溶液灌胃在治疗中风行为功能障碍的神经生物学机制。方法 本研究时间为2019年12月至
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81903836）——丹皮酚改善缺血性中风模型动物行为功能障碍的机制研究； 广东省中医药局局科研项目（20201086）——丹皮酚促进内源性神经干细胞增殖和分化改善缺血性中风模型动物行为功能障碍的机制研究；
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背景中风是严重危害人体健康的心脑血管系统疾病之一，具有高患病率、高致残率和高致死率的特征。牡丹皮是毛茛科植物牡丹干燥根皮，具有清热凉血、活血化瘀之功效。丹皮酚是牡丹皮的主要活性成分，已有研究证实在缺糖缺氧条件下，丹皮酚对神经元有一定保护作用。目的 观察丹皮酚对大脑中动脉缺血（MCAO）模型小鼠的干预效果，探究丹皮酚溶液灌胃在治疗中风行为功能障碍的神经生物学机制。方法 本研究时间为2019年12月至2021年12月。缺血性中风模型的建立与评价：将20只SPF级雄性C57BL/6小鼠，采用随机数字表法分成假手术组（n=10）、模型组（MCAO组，n=10），采用线栓法制成小鼠MCAO模型，造模24 h后，通过Longa评分评价各组小鼠神经功能受损情况；激光散斑血流成像系统监测各组小鼠在MCAO术后大脑血流改变状况；对MCAO术后的小鼠进行TTC染色，在病理上观察小鼠大脑的损伤情况。探究丹皮酚对MCAO小鼠的行为功能保护作用：将50只SPF级、雄性C57BL/6小鼠进行随机分组：假手术组（n=10）、模型+玉米油组（n=20）、模型+丹皮酚组（n=20）。造模后24 h，验证模型稳定后，模型+丹皮酚组用丹皮酚玉米油溶液灌胃，给药浓度为100 mg·kg-1·d-1，其余组灌服等量玉米油。在造模28 d后，统计三组小鼠的存活情况，绘制生存图线；使用Longa评分判断小鼠神经功能恢复情况；尼氏染色法检测小鼠大脑梗死面积；行为学测试小鼠在造模前及造模后7、14、21、28 d 5个时间点的运动感觉功能改变。探究丹皮酚对MCAO小鼠行为功能改善的机制：随机将30只SPF级、雄性C57BL/6小鼠分成假手术组（n=6）、模型+玉米油组（n=12）、模型+丹皮酚组（n=12）。造模后24 h，验证模型稳定后，药物组用丹皮酚玉米油溶液灌胃，给药浓度为100 mg·kg-1·d-1，其余组灌服等量玉米油。造模后2 d，用Western blotting法测定小鼠大脑纹状体白介素1β（IL-1β）蛋白表达情况，探究急性期内丹皮酚是否能降低大脑炎性反应；造模后14 d，采用免疫荧光法检测小鼠大脑半暗带离子钙结合衔接分子1（IBA1）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果 模型+玉米油组小鼠干预28 d的生存率为66.47%，丹皮酚组小鼠生存率为81.43%。Log-rank检验结果显示，三组小鼠干预28 d的生存曲线比较，差异有统计学意义（χ~2=1.436,P＜0.05）。造模28 d后，模型+丹皮酚组Longa评分低于模型+玉米油组（P＜0.05）。三组小鼠造模后14 d脑组织中IBA1、GFAP表达水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；模型+玉米油组、模型+丹皮酚组小鼠造模后14 d脑组织中IBA1、GFAP表达水平高于假手术组（P＜0.05）；模型+丹皮酚组小鼠造模后14 d脑组织中IBA1、GFAP表达水平低于模型+玉米油组（P＜0.05）。模型+玉米油组小鼠造模后2 d纹状体IL-1β蛋白表达水平高于假手术组（P＜0.05）；模型+丹皮酚组小鼠造模后2 d纹状体IL-1β蛋白表达水平低于模型+玉米油组（P＜0.05）。结论 丹皮酚可控制MCAO模型中小鼠在急性阶段的发症反应，减少了小鼠急性脑梗死面积，延长生存期、改善运动感觉功能。
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