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利用RT-PCR从分泌有谷胱甘肽结合部位的单克隆抗体杂交瘤细胞株2F3中,扩增出单抗重链可变区和轻链可变区基因.经DNA测序后,用Linker(Gly4Ser1)3构建成单链抗体(scFv)表达载体pTMF-scFv,将重组质粒pTMF-scFv转化到大肠杆菌BL21(DE3),实现了单链抗体的高效表达.表达的单链抗体占菌体总蛋白25%～30%.该重组蛋白以包涵体形式存在,分子量为30 kD.经过金属螯合亲和层析纯化、复性和凝胶过滤纯化,得到电泳均一的单链抗体.再经化学诱变,得到含硒单链抗体酶,其谷胱甘肽过氧化物酶活性为3 300U/μmol.采用荧光滴定法测定了单链抗体对谷胱甘肽的结合常数.