【摘 要】
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以小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞为研究对象,采用噻唑蓝法、细胞染色法、相关酶活力的测定以及蛋白免疫印迹等方法,研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)的免疫调节活性
【机 构】
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天津科技大学食品工程与生物技术学院
【基金项目】
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公益性行业(粮食)科研专项(201313006);天津市自然科学基金(青年项目)(16JCQNJC15000);国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2016YFNC010104-01)
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以小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞为研究对象,采用噻唑蓝法、细胞染色法、相关酶活力的测定以及蛋白免疫印迹等方法,研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)的免疫调节活性。噻唑蓝实验结果表明,当DHA质量浓度为800 ng/m L,作用48 h时,RAW264.7细胞增殖率达到最大值,为73.03%。中性红实验结果表明DHA可以显著增强RAW264.7细胞的吞噬活性。扫描电子显微镜结果显示DHA具有促进RAW264.7细胞活化的作用;吖啶橙染色结果表明在DHA作用下,细胞核酸代谢旺盛,RAW264.7细胞被激活;糖原染色结果表明DHA能通过促进RAW264.7细胞内糖原代谢加快细胞的分化。通过对RAW264.7细胞中相关酶活力的测定,结果表明DHA能够显著提高酸性磷酸酶、溶菌酶和超氧化物歧化酶的活力。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)蛋白通路结果表明:DHA能够引起细胞外信号调节激酶1/2、p38和应激活化蛋白激酶出现一定程度的磷酸化,说明DHA诱导巨噬细胞激活部分依赖了MAPKs信号转导通路。以上研究结果证明:DHA具有一定的免疫调节活性,可为DHA的应用提供理论依据。
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