人促红细胞生成素对大鼠急性创面转化生长因子β1/Smad3信号转导通路的影响

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目的

探究人促红细胞生成素(hEPO)对大鼠急性创面愈合相关转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号转导通路的影响。

方法

选取72只健康SD大鼠,在大鼠背部制成直径约2.5 cm的圆形急性创面,按随机数字表法将大鼠分为生理盐水对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组18只。4组大鼠每日常规清创后,生理盐水对照组大鼠创面予1 mL生理盐水浸润的纱布外敷,低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠创面每天分别予1 mL 50、100、150 U的hEPO浸润的纱布湿敷,再用6层干纱布包扎固定,每天换药1次。治疗3、7、14 d每组取6只大鼠行大体观察并计算创面愈合率,处死后取创面组织采用免疫组织化学法观察CD31和TGF-β1的表达,蛋白质印迹法检测3只大鼠磷酸化Smad3蛋白的表达。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD检验、Bonferroni校正。

结果

(1)治疗3 d,4组大鼠创面均有明显的渗出并有结痂。治疗7 d,低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠创面均较生理盐水对照组明显缩小。治疗14 d,4组大鼠创面均全部愈合。治疗7 d,与生理盐水对照组相比,中剂量组、高剂量组大鼠创面愈合率明显增加(P<0.01);余时间点,各组大鼠创面愈合率相近(P>0.05)。(2)CD31主要定位在血管上。除低剂量组治疗3、7 d(P>0.05)外,低剂量组大鼠治疗14 d和中剂量组、高剂量组大鼠治疗3~14 d创面组织中CD31表达均明显高于生理盐水对照组(P<0.01);除治疗3 d(P>0.05)外,中剂量组和高剂量组大鼠治疗7、14 d创面组织中CD31表达均明显高于低剂量组(P<0.01);除治疗3 d(P>0.05)外,高剂量组大鼠治疗7、14 d创面组织中CD31表达明显高于中剂量组(P<0.01)。(3)除低剂量组治疗3 d(1.9±0.7,P>0.05)外,低剂量组大鼠治疗7、14 d(3.3±1.0、3.7±0.7)和中剂量组、高剂量组大鼠治疗3~14 d创面组织中TGF-β1表达(3.3±1.0、3.6±1.0、3.9±0.9,3.4±0.7、3.8±0.8、4.2±0.4)均明显高于生理盐水对照组(1.7±0.5、2.7±1.0、3.0±0.9,P<0.01);除治疗7 d(P>0.05)外,中剂量组和高剂量组大鼠治疗3、14 d创面组织中TGF-β1表达均明显高于低剂量组(P<0.01);除治疗14 d(P<0.01)外,高剂量组大鼠治疗3、7 d创面组织中TGF-β1表达与中剂量组相近(P>0.05)。(4)除低剂量组治疗3、14 d及中剂量组和高剂量组治疗14 d(P>0.05)外,3组大鼠余时间点创面组织中磷酸化Smad3蛋白表达明显高于生理盐水对照组(P<0.01);除治疗14 d(P>0.05)外,中剂量组和高剂量组大鼠治疗3、7 d创面组织中磷酸化Smad3蛋白表达明显高于低剂量组(P<0.01);除治疗14 d(P>0.05)外,高剂量组大鼠治疗3、7 d创面组织中磷酸化Smad3蛋白表达明显低于中剂量组(P<0.01)。

结论

外源性hEPO可提高大鼠急性创面CD31、TGF-β1、磷酸化Smad3的表达,促进创面血管新生,激活TGF-β1/Smad3信号转导通路促进创面愈合。

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