数字聚合酶链反应在传染病病原体诊断中的应用展望

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuhonghuo
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传染病病原体的核酸定量检测在疾病诊断和治疗中至关重要.目前主要采用实时荧光定量PCR(real-time quantitation PCR,qPCR),其依赖的定量基础循环阈值(cycle threshold,Ct)受扩增效率的影响很大,故qPCR只能相对定量.数字PCR (digital polymerase chain reaction,dPCR)是一种核酸检测和绝对定量的新方法[1-2],其创新之处在于“样品分液”,通过通道、微流体芯片或液滴技术将待检DNA样品一次性平均分成大量微小液滴,每个液滴中含有不超过一个DNA分子,每个DNA分子均作为单独的PCR反应体,经PCR扩增后与荧光标记探针杂交,逐个对每个反应进行检测,用泊松分布公式可直接计算出阳性靶核酸分子的个数和比例,实现对单分子核酸的绝对定量[3-4]。

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