RNA干扰介导的转录因子E2F-1沉默对人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响

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目的 观察转录因子E2F-1基因RNA干扰(RNAi)的重组慢病毒载体(pLL-E2F-1-shRNA)对人胃癌裸鼠移植瘤E2F-1基因的表达和肿瘤生长的影响.方法 建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,随机分为pLL-E2F-1-shRNA组,pLL3.7组,生理盐水组.隔天向各组分别注射相应药物0.2 ml,共6次,并测量各组肿瘤体积.11 d后处死裸鼠,显微镜观察移植瘤组织形态变化;免疫组织化学法、半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测移植瘤中E2F-1基因的表达,脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡指数.结果 与生理盐水组和pLL3.7组比较,pLL-E2F-1-shRNA组肿瘤生长速度明显减慢(P<0.05);病理学观察确认所取组织为恶性肿瘤组织;免疫组织化学结果显示pLL3.7组和生理盐水组的肿瘤细胞细胞核内有少量棕褐色颗粒沉着,pLL-E2F-1-shRNA组肿瘤细胞细胞核内均未见或偶见棕褐色颗粒沉着;半定量RT-PCR和Western blot结果显示pLL-E2F-1-shRNA组E2F-1 mRNA表达较pLL3.7组和生理盐水组明显下降(P<0.05),E2F-1蛋白表达较pLL3.7组和生理盐水组减少75.2%和83.9%;pLL-E2F-1-shRNA组的凋亡指数(16.7±5.6)%明显高于pLL3.7组(10.5±4.1)%和生理盐水组(11.2±4.3)%(P<0.05).结论 慢病毒载体pLL-E2F-1-shRNA瘤内注射可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长。

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