【摘 要】
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以琥珀酸产生菌Actinobacillus succinogenes CGMCC 1593为出发菌,分别经过紫外线-甲基磺酸乙酯(UV-EMS)和紫外线-硫酸二乙酯(UV-DES)诱变处理,得到7株耐酸性有所提高的突变
【机 构】
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工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院;
【基金项目】
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国家863计划项目(No.2006AA02Z235);江苏省自然科学基金前期预研项目(No.BK2005201);长江学者创新团队发展计划项目(No.IRT0532)
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以琥珀酸产生菌Actinobacillus succinogenes CGMCC 1593为出发菌,分别经过紫外线-甲基磺酸乙酯(UV-EMS)和紫外线-硫酸二乙酯(UV-DES)诱变处理,得到7株耐酸性有所提高的突变株。以此作为候选菌库,经3轮原生质体递进融合,筛选获得4株可以在pH 5.6下生长的改组菌株。其中改组菌株F3-21在pH 5.6的完全液体培养基中生长的OD值是原始菌的7倍,在pH 5.2条件下仍能生长;其摇瓶发酵48 h琥珀酸产量较原始菌株提高48%。在5 L发酵罐中进行分批发酵,当控制pH在较低值(5.6~6.0)时,F3-21厌氧发酵48 h积累琥珀酸38.1 g/L,较出发菌株提高了45%;当控制pH在6.5~7.0时,F3-21厌氧发酵32 h积累琥珀酸40.7 g/L。F3-21在5 L发酵罐中进行补料分批发酵,厌氧发酵72 h,产琥珀酸达67.4 g/L。结果说明基因组改组技术能够改进琥珀酸放线菌的耐酸性能及其琥珀酸的产量。
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