【摘 要】
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目的：筛选中缅树鼩微卫星分子标记,逐步填补中缅树鼩缺乏特异性遗传标记的空白。方法：建立中缅树鼩基因小片段插入文库,利用5t端地高辛标记的(Ac)15探针从约1500个菌落中选
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所,昆明650118
【出 处】
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2011年第9届中国北方实验动物科技年会
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目的：筛选中缅树鼩微卫星分子标记,逐步填补中缅树鼩缺乏特异性遗传标记的空白。方法：建立中缅树鼩基因小片段插入文库,利用5t端地高辛标记的(Ac)15探针从约1500个菌落中选出36个阳性克隆。对这些克隆进行测序,发现其中15个含有重复序列,其中1个为重复克隆,1个因两端序列太短而不能设计引物。结果：用Primer3软件设计13对引物。PCR结果,13对均有条带。退火温度分布在44℃到52℃之间。阳性克隆率为2．4％,微卫星克隆率为1％。结论：利用地高辛标记探针筛选树鼩微卫星分子标记所得的微卫星克隆率,可达到传统放射性同位素标记探针同等的效果,并可避免放射性危害。树鼩微卫星分子标记的筛选将为下一步进行基因组结构的分析、树鼩遗传连锁图谱的构建、分子进化和标记辅助选择等提供大量的微卫星标记。
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