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目的
通过检测维吾尔族饲鸽者肺患者外周血HLA-DQA1基因甲基化程度探讨其临床意义。
方法以20例确诊维吾尔族饲鸽者肺患者为病例组,20名维吾尔族饲养鸽子未发病者为阴性对照组,20名维吾尔族未饲养鸽子健康体检者为正常对照组。收集资料并抽取外周血标本,常规提取DNA、亚硫酸盐转化、PCR扩增、体外转录和RNase A特异性酶切,并行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析技术检测HLA-DQA1基因甲基化情况。比较3组研究对象HLA-DQA1基因甲基化率是否存在差异,然后3组间两两比较HLA-DQA1基因甲基化率是否存在差异。
结果检测HLA-DQA1片段的CpG位点总数4个(CpG-1、CpG-2、CpG-3、CpG-4),实际检测到的CpG位点数3个(CpG-2、CpG-3、CpG-4)。3组样本中CpG-2、CpG-4甲基化率差异无统计学意义(χ2值分别为1.062、1.867,P值均>0.05)。3组样本中CpG-3甲基化率差异有统计学意义(χ2=11.978,P<0.05)。病例组、阴性对照组CpG-3甲基化率高于正常对照组(Z值分别为-3.116、-2.781,P值均<0.017),但病例组与阴性对照组CpG-3甲基化率差异无统计学意义(Z=-0.576,P>0.017)。
结论接触鸽子会影响HLA-DQA1基因甲基化。但HLA-DQA1基因甲基化对维吾尔族饲鸽者肺的发病有无影响尚需进一步研究。