【摘 要】
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目的 研究人Sigma-1受体高表达及大量纯化的方法 .方法 Sigma-1受体与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合在大肠杆菌中表达,TritonX-100抽提,蛋白酶酶切,直链淀粉、Ni2+离子亲合层析纯
【机 构】
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北京乾元浩生物股份有限公司,中国生物技术集团公司,西北民族大学生命科学与工程学院,Depamnent of Pharmacology
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目的 研究人Sigma-1受体高表达及大量纯化的方法 .方法 Sigma-1受体与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合在大肠杆菌中表达,TritonX-100抽提,蛋白酶酶切,直链淀粉、Ni2+离子亲合层析纯化,通过SDS-PAGE电泳、125I-碘化可卡因光亲合标记、[H3]-(+)-镇痛新结合活性检测.结果 表达纯化的Sigma-1受体相对分子质量约为26kDa的多肽,从表达到最后纯化倍数约为700,能够结合Sigma-1受体特异的光和标志物125I-碘化可卡因,也能结合配体[H3]-(+)-镇痛新.结论 实现了均一、有活性的Sigma-1受体大量表达和纯化.
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