反义bcr/ablRNA的体外转录和杂交

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为了转录出反义bcr/ablRNA,我们用逆转录。聚合酶链反应技术将bcr/abl嵌合转录体接合区扩增,并反向插到pGEM-4Z质粒SP6RNA聚合酶转录起始点下游作为体外转录的模板。限制酶切分析和DNA序列分析结果都证实插入片段序列与K562mRNA接合区完全一致。利用体外转录技术,我们成功地转录出跨bcr/abl接合区反义RNA。体外杂交实验的结果表明,该反义RNA具有杂交捕获bcr/ablmRNA接合区的功能,可应用于选择性抑制含bcr/abl基因的白血病细胞。
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