【摘 要】
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目的观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体(CB)1的关系。方法体外培养HSC-T6细胞，分为对照组、C66不同浓度组(1、2、5、10和20 mol/L)，细胞计数试剂盒-8检测其吸光度(A)值。选取最佳C66作用浓度及时间，分为对照组、TGF-β干预组、TGF-β＋CB1拮抗剂组、TGF-β＋C6
【机 构】
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325025 温州医科大学附属第一医院感染科 温州医科大学肝病研究所 温州市肝病重点实验室,325025 温州医科大学附属第一医院感染科 温州医科大学肝病研究所 温州市肝病重点实验室,325025 温
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目的观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体(CB)1的关系。
方法体外培养HSC-T6细胞，分为对照组、C66不同浓度组(1、2、5、10和20 mol/L)，细胞计数试剂盒-8检测其吸光度(A)值。选取最佳C66作用浓度及时间，分为对照组、TGF-β干预组、TGF-β＋CB1拮抗剂组、TGF-β＋C66干预组、TGF-β＋CB1拮抗剂＋C66联合干预组，分别培养48 h，以蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR检测CB1、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达，以蛋白质印迹法检测磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)表达水平。多样本均数方差齐性者采用LSD法进行两两比较，方差不齐者采用Dunnett T3检验，组间比较采用单因素方差分析。
结果C66能有效抑制HSC-T6增殖，呈现浓度和时间依赖性，其中10 μmol/L C66作用48 h对HSC-T6的抑制效果最明显，抑制率为54%。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA蛋白表达明显升高，差异均有统计学意义(t值分别为6.188、3.48和20.64，均P<0.05)。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA mRNA相对表达显著升高，差异均有统计学意义(t值分别为4.705、9.492和38.27，均P<0.05)。与对照相组比，TGF-β1干预组p-JNK水平显著升高，差异有统计学意义(t＝9.567，P<0.05)。
结论C66能有效抑制HSC-T6细胞的增殖及胶原合成，且联合使用CB1拮抗剂效果更明显，该过程可能涉及JNK磷酸化水平的调节，有助于理解肝纤维化发生、发展的机制及为治疗肝纤维化寻找新的靶点。
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