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利用简并引物克隆天山雪莲sikPIP基因片段及RNAi载体的构建

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：FSFASF

【摘 要】

：

利用NCBI、Bloekmaker、CODEHOP、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计简并引物并利用简并引物RT-PCR,首次从天山雪莲中克隆到474bp的PIP基因cDNA片段,命名为sikPIP,其

【作 者】

：

孙辉 祝建波 

【机 构】

：

石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室

【出 处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2010年6期

【关键词】

：

天山雪莲 sikPIP 简并引物 RNAI S.involucrata Kar.et Kir.sikPIP Degenerate primers RNAi 

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利用NCBI、Bloekmaker、CODEHOP、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计简并引物并利用简并引物RT-PCR,首次从天山雪莲中克隆到474bp的PIP基因cDNA片段,命名为sikPIP,其与GenBank中非洲杂交菊PIP基因氨基酸序列的同源性高达93.0%。从上述序列中选取200bp的序列,利用2对同尾酶将正义片段和反义片段插入到植物表达载体CAM2300-35S-Ocs中,成功构建天山雪莲RNAi载体CAM2300-35S-Ocs-sikPIP。为接下来的遗传转化,

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