【摘 要】
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目的 探索Runx1是否能够结合Mrgprd基因启动子序列,从而直接激活其转录.方法 构建包含小鼠rnMrgprd基因转录起始点上下游不同序列的一系列Mrgprd荧光素酶报告基因质粒及小鼠R
【机 构】
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430070湖北武汉,中部战区总医院耳鼻咽喉头颈外科;军事科学院军事医学研究院;430070湖北武汉,中部战区总医院麻醉科
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目的 探索Runx1是否能够结合Mrgprd基因启动子序列,从而直接激活其转录.方法 构建包含小鼠rnMrgprd基因转录起始点上下游不同序列的一系列Mrgprd荧光素酶报告基因质粒及小鼠Runx 1基因的表达质粒,在PC12细胞系中共转染其中一种Mrgprd荧光素酶报告基因质粒和Runx1表达质粒或者空载体对照质粒,利用双荧光素酶报告基因系统检测Runx1对这种Mrgprd荧光素酶报告基因的转录激活作用.通过比较Runx1对不同Mrgprd荧光素酶报告基因的转录激活作用的差异,寻找Runx1在Mrgprd基因上发挥调控作用的关键位点.结果 Mrgprd基因转录起始点上游562?200位点序列对于Runx1发挥转录激活作用至关重要,该段序列包含2个Runx1保守结合位点,但这两个位点的突变并不影响Runx1发挥对Mrgprd的转录激活作用.结论 Runx1对Mrgprd基因的转录调控机制可能有多种,并非只是通过结合在Mrgprd基因上游的结合位点来直接调控其转录,也可能通过其他方式间接调控Mrgprd基因的转录.
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