【摘 要】
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[目的]探索胚胎移植前供体牛与受体牛血浆外泌体miRNA的表达差异,以明确血浆外泌体miRNA在牛早期妊娠中的作用及其调控机制.[方法]以3～6岁、体重480～600 kg的夏南牛作为研究对象,选取10头供体牛进行同期发情、超数排卵和人工授精,23头受体牛只做同期发情处理.在人工授精后第7天,冲洗供体牛子宫以获取囊胚,选取3头囊胚数相近的供体牛及3头与供体牛体重和年龄均相近的受体牛,颈静脉采血,进行血浆外泌体的分离与鉴定;然后提取血浆外泌体miRNA,并检测其表达量;采用R语言中的DESeq差异算法计算P
【机 构】
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河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室,郑州450002;河南农业大学动物科技学院,郑州450008;河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室,郑
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[目的]探索胚胎移植前供体牛与受体牛血浆外泌体miRNA的表达差异,以明确血浆外泌体miRNA在牛早期妊娠中的作用及其调控机制.[方法]以3～6岁、体重480～600 kg的夏南牛作为研究对象,选取10头供体牛进行同期发情、超数排卵和人工授精,23头受体牛只做同期发情处理.在人工授精后第7天,冲洗供体牛子宫以获取囊胚,选取3头囊胚数相近的供体牛及3头与供体牛体重和年龄均相近的受体牛,颈静脉采血,进行血浆外泌体的分离与鉴定;然后提取血浆外泌体miRNA,并检测其表达量;采用R语言中的DESeq差异算法计算P值,并筛选出P＜0.05的miRNA,对差异表达的miRNA进行靶基因预测、GO功能富集分析和KEGG信号通路分析.[结果]6个样本的囊泡粒径均在135 nm左右,符合外泌体的特征.与供体牛相比,受体牛中有9个miRNAs表达显著上调(P＜0.05),13个miRNAs显著下调(P＜0.05);22个差异表达的miRNAs中,有15个miRNAs预测出无重复的靶基因 2990个.GO功能富集分析和KEGG信号通路分析的结果表明,这些靶基因主要富集在与生物黏附(biological adhesion)、定位(localization)、细胞连接(cell junction)功能有关的通路上,显著富集的信号通路与黏着斑(focal adhesion)、黏着连接(adherens junction)有关,提示血浆外泌体miRNA可能参与调控胚胎着床.[结论]研究结果可为筛选和探究影响胚胎着床的血浆外泌体miRNA提供参考,并为进一步阐明血浆外泌体miRNA在母牛早期妊娠调控中的作用提供依据.
其他文献
[目的]挖掘影响地方鸡体尺性状的有效SNP位点及功能基因,给儋州鸡育种工作提供有效的数据基础和理论支撑.[方法]共采集200只儋州鸡血样并提取基因组DNA,利用10×全基因组重测序技术获得全基因组SNP标记并对试验个体基因型进行分型.使用EMMAX软件基于混合线性模型对70日龄的儋州鸡体尺性状(胫长、胫围、体斜长、胸宽、髋骨宽、胸深、龙骨长)进行全基因组关联分析.[结果]共发现与胫长性状和胫围性状基因组水平显著相关的SNPs位点有12和8个,与胫长性状相关SNPs分别定位于1、2、4和8号染色体上;与胫围
[目的]探究大麦虫粉对黄羽肉鸡生产性能、肠道结构和菌群组成的影响.[方法]选择平均体重(BW)为(30.03±0.23)g的1日龄健康的黄羽肉鸡216只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复12只,分别饲喂以下3种饲粮:基础饲粮(对照组)、基础饲粮+1％大麦虫粉及基础饲粮+3％大麦虫粉.各组饲粮营养水平相同,试验期为63 d.分别统计21、42和63日龄各处理各阶段的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、体重(BW)、料重比(F/G)和死淘率.试验鸡于63日龄屠宰,取十二指肠、空肠、回肠组织用于
[目的]本试验旨在探究不同生长阶段宁都黄鸡的饲粮代谢能(ME)需要量.[方法]采用单因素完全随机试验设计,分别选用1、29、57日龄体重相近的宁都黄鸡各600、480和360只,各日龄阶段随机分为4个处理,每个处理6个重复,3个阶段每个重复分别为25、20和15只鸡.饲粮代谢能水平设低、较低、中和高4个梯度:1～28日龄分别为11.50、11.95、12.40和12.85 MJ/kg,29～56日龄分别为11.68、12.14、12.60和13.06 MJ/kg,57～105日龄分别为11.60、12.2
[目的]研究1株利用乳酸的猪源丁酸梭菌的基因组信息.[方法]采用厌氧培养法,通过乳酸分解培养基(LADM)初筛、梭菌增殖培养基(RCM)复筛,从饲喂乳酸菌发酵饲料的健康仔猪肠道内容物中分离利用乳酸快、丁酸转化率高的菌株,对所筛选的菌株进行形态鉴定、16S rDNA序列分析、乳酸转化特性试验、基因组重测序和框架图测序,并对其编码蛋白进行功能注释.[结果]分离得到1株分离菌LY33,基于形态和16S rDNA序列分析鉴定为丁酸梭菌.菌株LY33对乳酸具有较好的利用能力,在生长第6天可将66 mmol的乳酸基本
哺乳动物配子发生的基因表达调控包括编码基因的阶段特异性表达调控及非编码基因的转录和转录后水平调控.微小RNA (microRNA,miRNA)作为一类小的非编码RNA,通过识别靶基因非翻译区的结合位点,导致mRNA降解或者蛋白质翻译抑制,从而在转录后水平发挥调控作用.近年来,miRNA在哺乳动物生殖活动中的作用逐渐被揭示,越来越多的研究表明,miRNA在哺乳动物精子发生、精子成熟、卵母细胞成熟、卵泡发育及早期胚胎发育等过程中都发挥着重要的调节作用,其可通过调节支持细胞的增殖和凋亡或精原细胞、精母细胞及精细
[目的]研究骨形态发生蛋白受体Ⅱ(bone morphogenetic protein receptorⅡ,BM PRⅡ)基因多态性及其单倍型与藏羊产羔性状的相关性.[方法]以433只藏羊母羊为研究对象,采用改良多重高温连接酶检测反应技术(improved multiple ligase detection reaction,iMLDR)对BMPRⅡ基因9个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点在藏羊群体中的多态性进行检测,使用Haploview 4.2
[目的]探究冷冻前添加热休克蛋白A8 (heat shock protein A8,HSPA8)和解冻后添加不同浓度精浆(seminal plasma,SP)对冻融猪精子的影响.[方法]采用手握法采集长白猪精液,添加0.5 μμg/mL HSPA8到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装,投入液氮中保存3周后进行解冻,解冻后添加不同浓度精浆(0、10％、30％和50％),对冻融后长白猪精子的运动能力、质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等进行评估.[结果]与对照组相比(无HS
[目的]研究在体外培养液中添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对3-硝基丙酸(3-NPA)处理的小鼠受精卵体外发育能力的影响,为提高氧化应激早期胚胎体外发育质量提供参考.[方法]在小鼠受精卵体外培养液中添加0、20、50、100和150 ng/mL bFGF,培养24、48和96 h,统计2-细胞率、4-细胞率和囊胚率,筛选最佳bFGF处理浓度.经腹腔注射12.5 mg/kg 3-NPA生产氧化应激体内受精卵,正常组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,将获得的受精卵分为添加或不添加bFGF组,即3-NPA和3-
[目的]在从腹泻仔猪粪便中分离鉴定猪A群轮状病毒(Rotavirus group A,RVA)并了解其致病性.[方法]应用MA-104细胞从仔猪腹泻粪便中分离鉴定RVA,将其经口感染健康初生仔猪,观察其临床症状,并利用实时荧光定量PCR检测排毒、HE染色观察病理变化、免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)试验了解病毒分布.[结果]分离到1株可引起MA-104细胞明显细胞病变的G9P[23] RVA,命名为RVA/Pig-tc/CH N/SCJY-13/2017/G9P[23](简
[目的]探讨常见兽药恩诺沙星(ENR)、喹烯酮(QCT)、土霉素(OTC)和硫酸多黏菌素B(PMB)对细胞的单一及联合毒性效应.[方法]以L02、AML12、Marc145、HEK293T、TM3和SK-N-SH细胞为模型,通过结晶紫染色获得不同浓度下4种药物对6种细胞的相对抑制率,进行浓度-效应方程拟合,并分别计算药物在不同生长抑制率下的效应浓度(EG,其中F=10、20、25、33、50).按EC5∶EC50、EC33∶EC33∶EC33、E25∶EC25∶EC25∶EC25的比例分别进行二元、三元、