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中图分类号：S816 文献标识码：C 文章编号：1001-0769（2014）03-0029-03
卵内接种作为一种能够让1日龄雏鸡及早获得免疫力的有效方法已被人们广泛接受。尤其在美国，大多数大型专业化孵化场已采用这种技术。在美国以外的地区，卵内接种也被一些较小规模的孵化场采用。然而，孵化场的基本条件对使这种技术得到有效利用非常重要。
25年以前，肉鸡接种马立克氏病（Marek’s Disease，MD）疫苗的唯一方法是给1日龄雏鸡手工皮下注射。这种方法劳动强度大，对鸡有一定的应激性，并且会推迟雏鸡的入舍时间。平均而言，每人每小时可以接种大约2 000羽雏鸡，因此每天出壳250 000羽雏鸡的孵化场至少需要一个12个人的小组，并且需要配备足够大的房间供他们工作。
1992年，Embrex公司（现在是Pfizer动物保健公司世界家禽部的一部分）引进首个商用卵内接种设备解决了这一瓶颈。这种新技术不仅彻底改变了孵化场的免疫方法，而且对孵化场的操作方法产生了根本性的影响。
1 综合自动化
家禽行业仍在不断发展，每天的雏禽孵化数也一直在增加，因此采用人工手段进行疫苗接种不再是一个可行的解决方法。许多人相信，正是卵内接种技术的引进才导致了孵化场作业走向总体自动化，并由此带来了许多其它变化，如卫生条件的改善、早期接种其它疾病的疫苗。
促使开发商用卵内接种设备，最初源自位于密歇根州东兰辛的美国农业部（United States Department of Agricultrue，USDA）禽病与肿瘤学实验室进行的研究。研究表明，如果胚胎在快出壳前即第18～19天接种疫苗，可以产生一种抗MD的保护性免疫应答反应。这一发现引发了Embrex公司开发一种可以快速、准确地将疫苗接种入种蛋内并对胚胎安全的自动设备（图1）。
2 触发免疫反应
卵内接种的其中一个关键条件是每一次都能够一致地将相同剂量的疫苗注射入种蛋内正确的位置。如果希望诱发最好的免疫应答反应，疫苗必须注射入胚胎的羊水中或皮下。在第18/19天注射入羊水的疫苗会快速扩散到上呼吸道、肠道和法氏囊——所有能够产生抗疾病的免疫力的关键部位。
但是，如何将每一头份的疫苗同时注射入一个托盘中多达165枚种蛋的正确部位呢？种蛋具有不同的形状和大小，因此注射定位器需要能够对种蛋进行横向和纵向调整，以确保每一枚种蛋的蛋壳在正确的部位上进行穿刺。Embrex公司通过设计一种带有可扩展式管型凹模的移动压型探头系统地解决了这一问题，该凹模只需短短的一瞬，就能够接收到很多的空气以使每一个特定的探头固定在种蛋正确的部位上，从而确保注射针头在种蛋上有正确的轨迹（图2）。因此，每一枚种蛋都会分别进行处理。
3 母源抗体
除了孵化场自动化的益处外，卵内接种设备的采用也预示着这是肉鸡疫苗接种更为有效的方法。在胚胎第18/19天，卵黄中部分但非所有的母源抗体已被胚胎吸收。在出壳后的数几天内，雏鸡不会产生充足的母源免疫力。如果在这一期间胚胎接种活疫苗，那么疫苗毒株可以复制，且不会受到母源抗体太多的干扰，从而可以诱发产生良好的免疫应答反应（图3）；同时，胚胎因接种了疫苗会有足够的母源免疫力来保护其免受发生疾病。结果是在雏鸡进入鸡舍时，其能够最早地产生免疫应答反应，进而可保护其受到疾病的影响。
美国东海岸沿线传播着一种毒力超强的MD病毒，雏鸡较早就处于疾病威胁。通过采用卵内注射，疫苗在出壳前已经复制2～3 d，因此当雏鸡到达鸡场时，它们比在出壳当天接种疫苗的鸡只能够更好地应对疾病的威胁。
4 试验结果比较
上述情况也同样适用于传染性法氏囊疫苗，尤其是存在传染性法氏囊病毒变异株的地方，因为它往往感染年龄很小的雏鸡。然而，虽然早期接种的潜在益处在理论上可能很明显，但在实践中不是那么容易证明。实际上，对单个体的生产者而言这些效益很难体现出来，因为要说明其效果就必须进行一个“配对”研究，该研究中卵内接种和常规接种组在潜在的变异源上都相同。
这样一个试验需要种蛋来自同一肉种鸡群，在同一个储蛋室保存相同的时间，并且以完全相同的方式孵化，甚至位于孵化器内不同水平上的种蛋比例也需要相同。在出壳转移时，种蛋必须分到2个不同的孵化器，以避免雏鸡孵化时发生混淆。然后，雏鸡需要在两个独立的鸡舍中采用相同的环境条件饲养：相同的通风设备、饲喂器和饮水系统、完全相同的初始饲养密度。需要确保每一项条件都相同，除了免疫外，因而没有几个养鸡生产者愿意这么做。
然而，Pfizer动物保健公司全球家禽事业部掌握3个此类研究的数据，它们分别在1993、2000和2005年进行（表1）。研究普遍显示，卵内接种组种蛋的孵化率、雏鸡死亡率、体重和饲料转化率都获得了改善。正如所预料，在具体的数据上3个不同的研究存在差异。卵内接种组的饲料转化率改善了1～2个点。在美国，1个点代表可以为一个年产5千万羽鸡的养鸡场节省大约100 000美元。
5 关键问题
虽然卵内接种对许多孵化场来说具有潜在的益处，但它并非适用于每一个孵化场。为了决定卵内接种是否对孵化场来说是一种合适的解决方案，孵化场管理者需要回答许多关键性问题。批准的卵内接种疫苗是否可预防当地的疾病威胁？不是所有的卵内接种疫苗可用于所有的地区。接种未经允许的其它疫苗可能会导致严重的问题。在美国，过去10年左右可供生产者使用的卵内接种疫苗数量增加了1倍多，从4种增加到9种，并且更多的疫苗还在生产中。随着卵内接种设备在其它市场上的推广，疫苗的数量很可能会随着增多。
孵化场每月要孵化多少枚种蛋？每周要出壳转移出多少次？为了证明使用满容量（ full-size）Embrex Inovoject的合理性，孵化场每月需要平均入孵200万多枚种蛋。最近推出了一种小型半自动型Embrex产品组合（m型Inovoject），这意味着许多月孵化量较小（<200万枚/月）或厂房面积较少的孵化场现在也可以采用卵内接种技术。每小时出壳量位于12 000～20 000枚的孵化场可以考虑采用这种小型的设备。 孵化场使用了多少种不同的托盘规格？每一个Inovoject设备都是为某个特定托盘定制的。已有许多不同的规格可以利用，但如果孵化场使用了多种不同的托盘规格，所有的鸡只可能不能进行100 %的卵内接种。
6 合适的基础设施
如果这些初始的问题获得肯定的回答，那么下一步是检查孵化场的基础设施是否合适。为了确定这一点，Pfizer公司世界家禽部会进行2个调查。
一项调是确定厂房、空间分布、储存设施、水电设施、通风设备、空气压缩能力是否适合安装和运行卵内接种设备（图4、5）。
另一项是环境评估，以确定污染程度。从孵化场周围采集样本，并分析真菌和细菌的流行性，尤其是曲霉属真菌。因为卵内接种需要刺破蛋壳，孵化场的卫生是一个主要考虑的因素。利用卵内接种需要较低的污染风险已经成为迫使孵化场改善卫生条件的一种动力，近年来，这种情况已能够在美国的孵化场见到（图6）。
7 工作人员培训
这些调查结果确定在可以安装和成功运行卵内接种设备之前，如果有需要的话，哪些工作需要完成。一旦所有的安装条件都得到满足，工作人员得到科学的培训以及提供现场支持是非常必须的。
Pfizer动物保健公司全球家禽事业部的工作人员会在安装后的头2 w留在孵化场，以确保操作人员获得全面的培训，设备可以正常地工作。此外，他们会给孵化场留下常用的零件，因此一旦出现某种问题，可以用零件更换，设备能够以最短的停机时间再次工作。
Pfizer动物保健公司也提供快速上门服务，并会定期、有计划地进行上门维修，每9 w至少1次。
8 充分利用卵内接种技术
对那些已经安装了卵内接种设备的孵化场管理者提出一些有用的建议。
首先，需要确定疫苗准备是无菌的。如果疫苗没有充分混合和无菌准备，那么不仅会影响其功效，甚至可能会杀死雏鸡。每套Embrex Inovoject设备配制了一个双针头系统，以减少来自蛋壳表面的污染。外针用于在蛋壳上穿孔，而内针可穿过孔到达所要求的深度以注射疫苗。该系统会在两个针头间会利用消毒液的冲洗进行自动消毒。
自动消毒对设备成功接种疫苗至关重要，因为我们知道每个种蛋的表面都会有一定数量的细菌和真菌。然而，确保孵化场干净以及污染的表面如通风系统得到合理处理也非常重要。
9 未来的发展
当初卵内接种技术的应用主要集中在那些MD高发以及养鸡业较为稳定和劳动力成本较高的地区。卵内接种技术在美国90 %孵化厂都已经采用，在巴西和阿根廷大多数孵化场已应用。新的卵内接种疫苗的开发和上市、较高的劳动力成本，以及因养鸡行业日益巩固需要拥有更高效的孵化场，意味着卵内接种技术有可能推广到世界其它许多地区。□□
原题名：In technology driving hatchery modernization（英文）
原作者：Tarsicio Villalobos博士（美国，北卡罗来纳州，Pfizer家禽保健公司技术支持总监）
卵内接种作为一种能够让1日龄雏鸡及早获得免疫力的有效方法已被人们广泛接受。尤其在美国，大多数大型专业化孵化场已采用这种技术。在美国以外的地区，卵内接种也被一些较小规模的孵化场采用。然而，孵化场的基本条件对使这种技术得到有效利用非常重要。
25年以前，肉鸡接种马立克氏病（Marek’s Disease，MD）疫苗的唯一方法是给1日龄雏鸡手工皮下注射。这种方法劳动强度大，对鸡有一定的应激性，并且会推迟雏鸡的入舍时间。平均而言，每人每小时可以接种大约2 000羽雏鸡，因此每天出壳250 000羽雏鸡的孵化场至少需要一个12个人的小组，并且需要配备足够大的房间供他们工作。
1992年，Embrex公司（现在是Pfizer动物保健公司世界家禽部的一部分）引进首个商用卵内接种设备解决了这一瓶颈。这种新技术不仅彻底改变了孵化场的免疫方法，而且对孵化场的操作方法产生了根本性的影响。
1 综合自动化
家禽行业仍在不断发展，每天的雏禽孵化数也一直在增加，因此采用人工手段进行疫苗接种不再是一个可行的解决方法。许多人相信，正是卵内接种技术的引进才导致了孵化场作业走向总体自动化，并由此带来了许多其它变化，如卫生条件的改善、早期接种其它疾病的疫苗。
促使开发商用卵内接种设备，最初源自位于密歇根州东兰辛的美国农业部（United States Department of Agricultrue，USDA）禽病与肿瘤学实验室进行的研究。研究表明，如果胚胎在快出壳前即第18～19天接种疫苗，可以产生一种抗MD的保护性免疫应答反应。这一发现引发了Embrex公司开发一种可以快速、准确地将疫苗接种入种蛋内并对胚胎安全的自动设备（图1）。
2 触发免疫反应
卵内接种的其中一个关键条件是每一次都能够一致地将相同剂量的疫苗注射入种蛋内正确的位置。如果希望诱发最好的免疫应答反应，疫苗必须注射入胚胎的羊水中或皮下。在第18/19天注射入羊水的疫苗会快速扩散到上呼吸道、肠道和法氏囊——所有能够产生抗疾病的免疫力的关键部位。
但是，如何将每一头份的疫苗同时注射入一个托盘中多达165枚种蛋的正确部位呢？种蛋具有不同的形状和大小，因此注射定位器需要能够对种蛋进行横向和纵向调整，以确保每一枚种蛋的蛋壳在正确的部位上进行穿刺。Embrex公司通过设计一种带有可扩展式管型凹模的移动压型探头系统地解决了这一问题，该凹模只需短短的一瞬，就能够接收到很多的空气以使每一个特定的探头固定在种蛋正确的部位上，从而确保注射针头在种蛋上有正确的轨迹（图2）。因此，每一枚种蛋都会分别进行处理。
3 母源抗体
除了孵化场自动化的益处外，卵内接种设备的采用也预示着这是肉鸡疫苗接种更为有效的方法。在胚胎第18/19天，卵黄中部分但非所有的母源抗体已被胚胎吸收。在出壳后的数几天内，雏鸡不会产生充足的母源免疫力。如果在这一期间胚胎接种活疫苗，那么疫苗毒株可以复制，且不会受到母源抗体太多的干扰，从而可以诱发产生良好的免疫应答反应（图3）；同时，胚胎因接种了疫苗会有足够的母源免疫力来保护其免受发生疾病。结果是在雏鸡进入鸡舍时，其能够最早地产生免疫应答反应，进而可保护其受到疾病的影响。
美国东海岸沿线传播着一种毒力超强的MD病毒，雏鸡较早就处于疾病威胁。通过采用卵内注射，疫苗在出壳前已经复制2～3 d，因此当雏鸡到达鸡场时，它们比在出壳当天接种疫苗的鸡只能够更好地应对疾病的威胁。
4 试验结果比较
上述情况也同样适用于传染性法氏囊疫苗，尤其是存在传染性法氏囊病毒变异株的地方，因为它往往感染年龄很小的雏鸡。然而，虽然早期接种的潜在益处在理论上可能很明显，但在实践中不是那么容易证明。实际上，对单个体的生产者而言这些效益很难体现出来，因为要说明其效果就必须进行一个“配对”研究，该研究中卵内接种和常规接种组在潜在的变异源上都相同。
这样一个试验需要种蛋来自同一肉种鸡群，在同一个储蛋室保存相同的时间，并且以完全相同的方式孵化，甚至位于孵化器内不同水平上的种蛋比例也需要相同。在出壳转移时，种蛋必须分到2个不同的孵化器，以避免雏鸡孵化时发生混淆。然后，雏鸡需要在两个独立的鸡舍中采用相同的环境条件饲养：相同的通风设备、饲喂器和饮水系统、完全相同的初始饲养密度。需要确保每一项条件都相同，除了免疫外，因而没有几个养鸡生产者愿意这么做。
然而，Pfizer动物保健公司全球家禽事业部掌握3个此类研究的数据，它们分别在1993、2000和2005年进行（表1）。研究普遍显示，卵内接种组种蛋的孵化率、雏鸡死亡率、体重和饲料转化率都获得了改善。正如所预料，在具体的数据上3个不同的研究存在差异。卵内接种组的饲料转化率改善了1～2个点。在美国，1个点代表可以为一个年产5千万羽鸡的养鸡场节省大约100 000美元。
5 关键问题
虽然卵内接种对许多孵化场来说具有潜在的益处，但它并非适用于每一个孵化场。为了决定卵内接种是否对孵化场来说是一种合适的解决方案，孵化场管理者需要回答许多关键性问题。批准的卵内接种疫苗是否可预防当地的疾病威胁？不是所有的卵内接种疫苗可用于所有的地区。接种未经允许的其它疫苗可能会导致严重的问题。在美国，过去10年左右可供生产者使用的卵内接种疫苗数量增加了1倍多，从4种增加到9种，并且更多的疫苗还在生产中。随着卵内接种设备在其它市场上的推广，疫苗的数量很可能会随着增多。
孵化场每月要孵化多少枚种蛋？每周要出壳转移出多少次？为了证明使用满容量（ full-size）Embrex Inovoject的合理性，孵化场每月需要平均入孵200万多枚种蛋。最近推出了一种小型半自动型Embrex产品组合（m型Inovoject），这意味着许多月孵化量较小（<200万枚/月）或厂房面积较少的孵化场现在也可以采用卵内接种技术。每小时出壳量位于12 000～20 000枚的孵化场可以考虑采用这种小型的设备。 孵化场使用了多少种不同的托盘规格？每一个Inovoject设备都是为某个特定托盘定制的。已有许多不同的规格可以利用，但如果孵化场使用了多种不同的托盘规格，所有的鸡只可能不能进行100 %的卵内接种。
6 合适的基础设施
如果这些初始的问题获得肯定的回答，那么下一步是检查孵化场的基础设施是否合适。为了确定这一点，Pfizer公司世界家禽部会进行2个调查。
一项调是确定厂房、空间分布、储存设施、水电设施、通风设备、空气压缩能力是否适合安装和运行卵内接种设备（图4、5）。
另一项是环境评估，以确定污染程度。从孵化场周围采集样本，并分析真菌和细菌的流行性，尤其是曲霉属真菌。因为卵内接种需要刺破蛋壳，孵化场的卫生是一个主要考虑的因素。利用卵内接种需要较低的污染风险已经成为迫使孵化场改善卫生条件的一种动力，近年来，这种情况已能够在美国的孵化场见到（图6）。
7 工作人员培训
这些调查结果确定在可以安装和成功运行卵内接种设备之前，如果有需要的话，哪些工作需要完成。一旦所有的安装条件都得到满足，工作人员得到科学的培训以及提供现场支持是非常必须的。
Pfizer动物保健公司全球家禽事业部的工作人员会在安装后的头2 w留在孵化场，以确保操作人员获得全面的培训，设备可以正常地工作。此外，他们会给孵化场留下常用的零件，因此一旦出现某种问题，可以用零件更换，设备能够以最短的停机时间再次工作。
Pfizer动物保健公司也提供快速上门服务，并会定期、有计划地进行上门维修，每9 w至少1次。
8 充分利用卵内接种技术
对那些已经安装了卵内接种设备的孵化场管理者提出一些有用的建议。
首先，需要确定疫苗准备是无菌的。如果疫苗没有充分混合和无菌准备，那么不仅会影响其功效，甚至可能会杀死雏鸡。每套Embrex Inovoject设备配制了一个双针头系统，以减少来自蛋壳表面的污染。外针用于在蛋壳上穿孔，而内针可穿过孔到达所要求的深度以注射疫苗。该系统会在两个针头间会利用消毒液的冲洗进行自动消毒。
自动消毒对设备成功接种疫苗至关重要，因为我们知道每个种蛋的表面都会有一定数量的细菌和真菌。然而，确保孵化场干净以及污染的表面如通风系统得到合理处理也非常重要。
9 未来的发展
当初卵内接种技术的应用主要集中在那些MD高发以及养鸡业较为稳定和劳动力成本较高的地区。卵内接种技术在美国90 %孵化厂都已经采用，在巴西和阿根廷大多数孵化场已应用。新的卵内接种疫苗的开发和上市、较高的劳动力成本，以及因养鸡行业日益巩固需要拥有更高效的孵化场，意味着卵内接种技术有可能推广到世界其它许多地区。□□
原题名：In technology driving hatchery modernization（英文）
原作者：Tarsicio Villalobos博士（美国，北卡罗来纳州，Pfizer家禽保健公司技术支持总监）