【摘 要】
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目的应用基因工程技术，在昆虫细胞中表达汉坦病毒（HV）S基因，表达产物作为诊断抗原，用于检测血清中抗HV特异性抗体IgG。方法PCR扩增HV-Z10株N蛋白（NP）编码基因，基因工程方法构建NP编码基因昆虫表达系统rBAC-Z10S-TN。间接荧光法了解重组NP（rNP）表达及与特异性免疫反应情况，SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况。建立免疫印迹法检测肾综合征出血热（HFRS）患者血清样品，并与
【机 构】
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目的应用基因工程技术，在昆虫细胞中表达汉坦病毒（HV）S基因，表达产物作为诊断抗原，用于检测血清中抗HV特异性抗体IgG。
方法PCR扩增HV-Z10株N蛋白（NP）编码基因，基因工程方法构建NP编码基因昆虫表达系统rBAC-Z10S-TN。间接荧光法了解重组NP（rNP）表达及与特异性免疫反应情况，SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况。建立免疫印迹法检测肾综合征出血热（HFRS）患者血清样品，并与常规间接免疫荧光法进行比较。
结果rBAC-Z10S-TN高效表达rNP，SDS-PAGE显示rNP的蛋白表达带，此抗原仅与HFRS患者血清起反应。经双盲试验，两法检测血清143份，HFRS阳性符合率为97.67%。
结论成功构建了HV-Z10株NP编码基因高效真核表达系统。所建立的免疫印迹法可作为HFRS简便、安全、敏感、特异的血清学诊断新方法。
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