【摘 要】
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目的为了探讨脐血CD34+干/祖细胞在不同细胞因子支持下体外扩增过程中Caspase-3表达及意义,我们采用了RT-PCR、Westeblot和流式细胞仪技术测定了脐血CD34+细胞在体外扩增过程
【机 构】
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武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院,430022;Xiehe Hospital, Tongji Medical University, Huazhong University of Science
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目的为了探讨脐血CD34+干/祖细胞在不同细胞因子支持下体外扩增过程中Caspase-3表达及意义,我们采用了RT-PCR、Westeblot和流式细胞仪技术测定了脐血CD34+细胞在体外扩增过程中的生物学特性及Caspase-3的表达.检测结果显示,Caspase-3mRNA在新鲜分离的脐血CD34+细胞中低水平表达,在细胞因子支持下体外培养3天,扩增的CD34+细胞中Caspase-3mRNA和蛋白质水平表达上调,但在这两种细胞中仅能检测到分子量为32KDa的非活性酶原形式的Caspase-3;随着体外培养时间的延长,在IL-3,IL-6和GM-CSF组合条件下,Caspase-3被激活,可检测到分子量为20KDa的裂解片段.本研究表明,虽然造血干细胞的凋亡是个复杂的过程,但在脐血CD34+干/祖细胞体外扩增过程中,Caspase-3参与了凋亡事件并发挥着重要的作用.
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