中国蛇岛蝮蛇毒蛋白的电泳结合串联质谱法分析

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采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)对中国辽宁蛇岛蝮(Glovdius shedaoensis)蛇毒(GSSV)进行分离,染色结果显示该蛇毒中含有多种相对分子质量为12~85ku的蛋白组分。凝胶上切割的蛋白带经胶内二疏苏糖醇(DTT)还原和碘乙酰胺(IAM)修饰后进行胰蛋白酶水解,所得肽段采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC—nESI MS/MS)进行分析,蛋白鉴定采用Sequest Bioworks软件搜索NCBInr数据库完成。从GSSV中鉴定出超过25种蛋白组分,主要包括:
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