复方克林霉素磷酸酯维A酸凝胶抑菌效力测试与评价

来源 :延边医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fishonscreen
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  摘要: 目的:考察复方克林霉素磷酸酯维A酸中所添加的抑菌剂是否合理。方法: 取样品适量接种5种代表微生物,分别在0h、24h、48h、7d、14d、28d测试微生物存活情况,评判所添加抑菌剂的抑菌效力。结果:复方克林霉素磷酸酯维A酸处方中所添加抑菌剂对铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉等4种代表试验菌均无较好的抑制作用。结论: 建议重新考查处方中抑菌剂的种类及添加量。
  关键词:复方克林霉素磷酸酯维A酸;凝胶制剂;抑菌效力
  抑菌剂(也称防腐剂) 是一类防止或限制微生物生长与繁殖的化学药品, 其主要作用是保证药剂质量, 防止药剂的微生物污染。如果药物本身不具有充分的抗菌效力,那么应根据制剂特性(如水溶液制剂)添加适宜的抑菌剂,以防止制剂在正常贮藏或使用过程中可能发生的微生物污染和繁殖使药物变质而对使用者造成危害,尤其是多剂量包装的制剂[1,4]。复方克林霉素磷酸酯维A酸凝胶为多剂量外用凝胶制剂,主要对革兰阳性球菌及厌氧菌有较强的抗菌活性,为窄谱抗生素[2]。由于其在使用过程中存在多次打开包装有被污染的风险,其处方中需要添加一定量的抑菌剂,而所有的抑菌剂都有一定的毒性,制剂中抑菌剂的量应为最低有效量[1]。目前国内对凝胶制剂抑菌效力研究这方面的报道较少。本文采用适宜的方法对该产品进行了抑菌效力测试,考察复方克林霉素磷酸酯维A酸处方中所添加的抑菌剂是否安全有效。
  1仪器与材料
  1.1 仪器
  隔水式电热恒温培养箱(重庆四达实验仪器厂,WGP-600);生化培养箱(上海一恒科技有限公司,LRH-250);生物安全柜(上海力申科技仪器公司,HF Safe 760s);比浊仪(美国生物梅里埃公司,Densi CHEK Plus);封闭式集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司,HTY-2000);薄膜过滤器(杭州泰林生物技术设备有限公司,FC-752)。
  1.2 培养基
  胰酪胨大豆琼脂(TSA)培养基(批号121209),胰酪胨大豆肉汤(TSB)培养基(批号120108),沙氏葡萄糖液体(SDB)培养基(批号110411),沙氏葡萄糖琼脂(SDA)培养基(批号 110718),0.1%蛋白胨水溶液(批号110221),PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(批号110718),(以上培养基均由北京三药科技开发公司提供。培养基适用性检查实验结果符合《中国药典》2010年版要求。
  1.3 菌种
  金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)[CMCC(B)26003],大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC(B)44102] ,铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)[CMCC(B)10104],白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F)98001],黑曲霉(Aspergillus niger)[CMCC(F)98003]以上菌株均源自中国医学细菌保藏中心,验证试验所用的菌株均为第2代。
  1.4供试品
  复方克林霉素磷酸酯维A酸凝胶(批号,111121-1,111121-2,111121-3)由北京XX生物技术有限公司提供。
  2方法与结果
  2. 1 计数方法学验证实验
  2.1.1 供试液制备
  取供试品10g,加PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,制备成1:10供试液。
  2.1.2计数方法
  复方克林霉素磷酸酯维A酸本身对革兰阳性球菌及厌氧菌有较强的抗菌活性,因此,微生物计数试验时,应采用薄膜过滤法消除抑菌活性[3]。
  取制备好的1:10供试液1mL,加入含50mL0.1%蛋白胨水溶液的薄膜过滤器中,全部通过薄膜过滤器后用0.1%蛋白胨水溶液冲洗3次,100mL/次,在最后一次冲洗液中分别加入50~100cfu金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌菌液,取膜贴至TSA平板,置35℃培养48小时进行细菌计数验证方法,结果见表1。
  取制备好的1:10供试液1mL和50~100cfu的白色念珠菌和黑曲霉菌试验菌液,立即注入45℃融化的SDA培养基15~20mL,摇匀,凝固后,置25℃培养72小时进行真菌和酵母菌计数方法验证,结果见表1。
  通过3次独立的平行试验,采用薄膜过滤法(冲洗量300mL/膜)进行细菌计数,结果金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的回收率均高于70%,说明采用薄膜过滤法可有效去除抑菌活性;采用平皿法(1mL/皿)进行霉菌和酵母菌数计数,结果白色念珠菌和黑曲霉菌的回收率均高于70%。
  2.1.3结果
  采用薄膜过滤法(取1:10供试液1mL,薄膜过滤,冲洗量300mL/膜)进行细菌计数,采用平皿法(1mL/皿)进行霉菌和酵母菌数计数。
  2. 2抑菌效力测试实验
  2.2.1供试液制备同2.1
  2.2.2菌悬液制备
  接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌至胰酪胨大豆肉汤(TSB)培养基中,35℃培养18~24小时,再从TSB培养基中取新鲜培养物至胰酪胨大豆琼脂斜面(TSA), 35℃培养18~24小时,以0.9%无菌氯化钠溶液制成每1mL含菌数为108cfu的菌悬液;接种白色念珠菌新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂(SDA)斜面,25℃培养24~48小时,以0.9%无菌氯化钠溶液制成每1mL含菌数为108cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基斜面,20~25℃培养5~7天后,用含0.05%聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1mL含菌量约为108cfu的孢子悬液。
  2.2.3制备方法
  由上表可知,将定量比浊的菌悬液金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌菌悬液及黑曲霉孢子悬液各100μL接种至10mL1:10的复方克林霉素磷酸酯维A酸凝胶中,金黄色葡萄球菌在接种后7天下降5.4lg,出现明显的减少,表明本产品对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用,说明本品在使用、储存过程中不易被此种菌污染。大肠埃希菌在接种后24小时、48小时、7天、14天、28天在0.6lg范围内浮动,铜绿假单胞菌在接种后14天增加了0.6lg,14天到28天基本无变化,表明本品中所添加的抑菌剂对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌无较好的抑制作用。白色念珠菌菌悬液在接种后14天增加了0.8lg,黑曲霉孢子悬液保持数量级不变,说明本品中所添加抑菌剂的量对霉菌及酵母菌无抑制作用,本品在使用、储存过程中易被污染。
  试验结果表明供试品对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用,呈现明显的下降趋势,而对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌无明显作用,且铜绿假单胞菌在试验过程中还有增加的趋势。放置过程中对真菌作用也不明显,白色念珠菌有增加的趋势,说明该药物中所添加的抑菌剂不符合抑菌剂作用范围广泛、防腐起效迅速的要求[4],产品在使用过程中有被污染的风险,无较强的抑制污染菌生长的作用。建议在处方中加入防腐剂的最小有效量或对种类另做考察,以确保该药在使用过程中的安全有效。
  3讨论
  本供试品为凝胶制剂,铝管包装,每支15g。由于其包装剂型的特殊性无法直接接入原包装中,故采用将其取出制备供试液。试验采用经过方法验证的方法即细菌采用薄膜过滤法,真菌采用平皿法进行测试。为保证实验结果的客观性,实验采用菌液在0.9%氯化钠溶液中的放置同步测定,以及供试品组0时测定值两组对照判断供试品组菌数变化情况,并增加了1天、2天两个取样时间点,比较供试品对不同菌株的抑菌效力差异。
  考虑到实验过程平行性,实验所用样品采用3批同步操作,取均值报告。
  参考文献:
  [1]国家药典委员会.中国药典[S].2010年版,二部附录XIX N,2010:215.
  [2]李海涛,于学珍,林家红.复方克林霉素磷酸酯凝胶的制备及质量控制.药学进展,2006,30(6):270-273.
  [3]丁郣,功丽萍,谢元超.阿奇霉素滴眼液抑菌剂筛选与抑菌效力研究[J].中国药品标准,2012,13(4):281-284.
  [4]张新妹,胡昌勤,姜彩辉等.滴眼剂中防腐剂的合理应用[J].广东药学院学报,2003,19(3):268-269.
其他文献
摘要:目的:观察赛肤润外用涂搽预防治疗可迭龙致静脉炎的发病率。方法: 60例经外周静脉持续注射可达龙的患者随机分为赛肤润组、对照组,每组3O例,分别给予赛肤润预防性外用以及不用赛肤润预防性外用治疗,治疗3d后评定治疗效果。结果:赛肤润预防使用后,可达龙致静脉炎的发病率明显较对照组低,且发生严重静脉炎的几率仅3.33%,明显低于对照组,差异有统计学意义(P10 min),然后可达龙450 mg加5%
期刊
摘要:对47例腰椎间盘突出症患者行CT引导下椎间隙注射(O3)用21G穿刺针,经侧后方途径和关节突内侧缘进针。病变椎间盘突出部位注射臭氧15-20ml(60ug/ml)。随访3-18个月,根据MacNab腰腿痛手术治疗评定标准经行评定,显效27例,有效16例,无效4例,总有效率91.48%。认为CT引导下椎间隙注射臭氧治疗腰椎间盘突出症安全有效。  关键词:臭氧;腰椎间盘突出症;CT引导  O3俗
期刊
摘要:目的 :探讨临床护理中健康教育的有效的培养模式。方法:对我院护理专业实习生分两组分别实行传统带教模式和改进教学模式,对两组的健康教育能力进行比较,并对实验组的实施效果进行问卷调查,以评价教学改革的效果。结果:与对照组相比,实验组学生阶段性成绩均有显著性提高,对实验组进行问卷调查满意度较高。结论:有效的健康教育带教模式可以提高实习生的学习兴趣,提高护理质量。  关键词:健康教育;带教模式;问题
期刊
摘要:目的: 研究翼状胬肉切除联合自体游离结膜瓣移植术对翼状胬肉的临床治疗效果。方法:本次研究对象为2012年3月~2014年3月门诊收治的64例翼状胬肉患者,以治疗方式为基础将其分为治疗组和对照组,治疗组患者行翼状胬肉切除联合自体游离结膜瓣移植术,对照组行单纯翼状胬肉切除术。分析评价并统计两组患者的临床治疗效果。结果:术后治疗组治愈率约为84.8%,复发率约为9.4%;对照组治愈率约为62.5%
期刊
胰十二直肠损伤患者在创伤外科中并不常见,然而死亡率高,并发症较多,且易漏诊误诊,我院为基层医院,自2001年1月—2013年12月共收治胰十二直肠损伤12例,现总结如下:  1.临床资料  1.1一般资料 本组12例,其中男9例,女3例,年龄18—56岁,平均年龄28岁,受伤至就诊时间0.5—3小时不等 ,闭合性损伤8例,开放性损伤4例,且均为刀刺伤。  1.2损伤情况 本组十二指肠损伤8例,胰腺
期刊
摘要: 目的:探讨卵巢硬化性的间质瘤(sclerosing stromal tumour,STT)病例的临床表现特点、病理诊断及鉴别诊断,以期提高临床与病理对该病认识的准确性。方法:搜集我院2例卵巢硬化性间质瘤病例的临床病理材料,并对国内外公开发表的卵巢硬化性间质瘤病例的相关文献进行复习。结果:肿瘤呈实性或囊性,界清,光镜下瘤细胞丰富区与疏松水肿区相间呈假小叶状结构,免疫表型常表达Vimentin
期刊
摘要:目的:探讨胸腺切除术治疗重症肌无力患者的围手术期护理。方法:回顾性分析和总结58 例重症肌无力患者进行扩大胸腺切除术的围手术期护理特点。结果:58 例病人无手术及住院死亡。46例病人肌无力症状缓解,12 例症状较术前改善。结论:术前控制呼吸道感染改善肺功能,术后加强呼吸道护理,合理有效地使用抗胆碱酯酶药物,正确预防、判断及处理肌无力危象、胆碱能危象是护理关键,也是减少并发症、提高手术成功率的
期刊
摘要:目的:对盐酸纳洛酮和七叶皂苷钠在急性重型颅脑损伤治疗中的应用效果进行观察。方法:临床选取2013年4月-2014年4月在我院实施治疗的96例急性重型颅脑损伤患者,将其平均分成三组,每组32例,其中对照组1组患者单纯实施七叶皂苷钠治疗,对照2组单纯实施盐酸纳洛酮治疗,观察组患者则实施盐酸纳洛酮结合七叶皂苷钠治疗。治疗结束后对三组患者的颅内压和GCS评分进行对比分析。结果:观察组患者颅内压和其他
期刊
摘要:最近几年随着我国医疗卫生事业的不断发展,人们也越来越意识到健康检查的重要性。医院体检管理系统作为医院信息化建设的重要组成部分,因为该系统具有操作便捷、数据准确等优点被广泛运用到医院体检管理中,在很大程度上提高了体检的工作效率。本文笔者主要结合自身所属医院的体检管理信息系统,探讨了该系统的开发和应用,以便为相关工作者和研究者提供参考和借鉴。  关键词:医院;体检管理;信息系统;开发;应用  当
期刊
摘要: 目的:通过CT增强扫描高压给药,研究不良反应的护理及预防。方法:回顾性分析560例患者高压给药后的过敏反应及渗漏发生率及其程度。结果:轻度反应15例:占总例数2.68%。中度反应2例:占总例数0.36%。造影剂轻度渗漏2例:占总例数0.36%。结论:针对高压给药的特殊性,制定相关护理预防措施,降低过敏反应及渗漏的发生率,让患者达到安全满意的预期检查效果。  关键词:高压给药;CT增强;护理
期刊