【摘 要】
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目的 探讨Notch1对骨髓源性脂肪祖细胞(BMAPCs)向脂肪细胞分化的影响.方法 无菌取SD大鼠股、胫骨骨髓制作细胞悬液,差速贴壁法培养,流式分析检测细胞表面标志表达;实时荧光定
【机 构】
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成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心、干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室、昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院,昆明,650032重庆市公安局渝中区分
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目的 探讨Notch1对骨髓源性脂肪祖细胞(BMAPCs)向脂肪细胞分化的影响.方法 无菌取SD大鼠股、胫骨骨髓制作细胞悬液,差速贴壁法培养,流式分析检测细胞表面标志表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)检测脂肪相关基因和Notch信号分子表达.Notch1基因沉默实验分为空载体组和Notch1小RNA干扰组.Western blotting检测干扰效率;STEMPRO(R) Adipogenesis Differentiation Kit行细胞成脂诱导.结果 BMAPCs表达CD34、CD44、CD45及CD90,且表达6种脂肪相关基因及Notch信号分子;成脂诱导促进Notch1 mRNA表达(P＜ 0.01);Notch1小RNA干扰抑制Notch1蛋白表达(P＜0.05).Notch1小RNA干扰组的Cebpa、Lpl和Ppay、Slc2a4与Fabp4 mRNA表达均较对照显著降低,而pread1 mRNA表达显著增加(P＜ 0.05～P＜ 0.01);Notch小RNA干扰显著抑制脂肪细胞百分率(P＜0.05).结论 Notch1基因沉默抑制BMAPCs向成熟脂肪细胞分化.
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