【摘 要】
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目的建立一种清道夫受体BI(SR-BI)基因敲除突变小鼠基因型的鉴定方法。方法参照碱基淬灭探针技术原理,设计鉴定野生型和突变型SR-BI基因的引物探针。反应体系经PCR扩增后,利
【机 构】
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苏州大学附属第三医院综合实验室,苏州大学附属第三医院胸外科,瑞典隆德大学临床化学系,
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目的建立一种清道夫受体BI(SR-BI)基因敲除突变小鼠基因型的鉴定方法。方法参照碱基淬灭探针技术原理,设计鉴定野生型和突变型SR-BI基因的引物探针。反应体系经PCR扩增后,利用融解曲线功能判断小鼠基因型。结果新方法可在1h内完成基因型分析。野生型和突变型纯合子小鼠分别在(53.25±0.81)℃及(62.25±0.31)℃处出现单个融解谷;而杂合子小鼠在两处均出现融解谷。结论新方法简单、快速、准确,适用于鉴别SR-BI基因敲除突变小鼠的基因型。
Objective To establish a method for identifying genotypes of scavenger receptor BI (SR-BI) knockout mice. Methods According to the principle of base quenching probe, primer probes for identification of wild-type and mutant SR-BI genes were designed. After the PCR system was amplified by PCR, the mouse genotypes were determined by using the melting curve function. Results The new method completed genotyping within 1 h. The wild-type and mutant homozygous mice showed a single thawing valley at (53.25 ± 0.81) ℃ and (62.25 ± 0.31) ℃ respectively, whereas the heterozygous mice showed thawing valley at two sites. Conclusion The new method is simple, rapid and accurate and is suitable for the identification of genotypes in SR-BI knockout mice.
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